AJUSTE DE LAS CONDICIONES DE CRIOCONSERVACIÓN CON MATERIALES DE YUCA RECALCITRANTES A LA CONGELACIÓN Norma C. Manrique, Roosevelt H. Escobar y Joseph Tohme Proyecto de Agrobiodiversidad y Biotecnología, Centro Internacional de Agricultura Tropical – CIAT AA 6713, Cali, Colombia INTRODUCCIÓN 4. Ápices pre-crecidos durante 5 días presentaron mayor capacidad para resistir los procesos de crioconservación. Sin embargo, hacen Conservar los recursos genéticos de una especie cultivada, es de vital menos viable el proceso de almacenamiento a gran escala. importancia ya que evita pérdidas de biodiversidad y facilita su acceso y uso en la investigación y en la agricultura. En el Centro Días de Precrecimiento % Formación de brotes Internacional de Agricultura Tropical-CIAT se desarrolló un protocolo de crioconservación para establecer un banco básico de la 5 días 90,66±3,66a colección mundial de yuca (Manihot esculenta Crantz). 4 días 68,57±9,31b 3 días Las fases de pre-tratamiento y secado del proceso de crioconservación 64,99 ±9,96b afectan drásticamente la respuesta después de la congelación. Para Valores con diferente letra indica diferencias significativas (nivel de significancia α=0.05) ± SE (desviación estándar). resolver estas diferencias se plantearon algunos ajustes al proceso de Encapsulación-Deshidratación usando materiales considerados 5. La adición de ABA al medio de pre-crecimiento no mejora recalcitrantes a la congelación (con muy baja o nula respuesta). En significativamente la respuesta de los ápices congelados. Es posible algunos casos, esto generó un aumento en los porcentajes de que puntualice su efecto bajo otras condiciones. recuperación de plantas después de la congelación. Genotipo 0.1 µM 1 µM 5 µM 10 µM Control MBol3 0 25 0 6.67 27.14 MATERIALES Y METODOS MCol1468 6.25 38.33 42 20 37.08 MCol1939 40 0 4.16 0 5 MEcu165 20.83 12.5 5 9.17 MEcu31 11.2 0 0 0 62.5 MPer205 0 0 0 0 0 Precrecimiento Encapsulación Pretratamiento Cargado El análisis estadístico mostró una interacción significativa entre los tratamientos y los genotipos para la variable % de Brotes. 6. Se plantea como alternativa, la producción de ápices iniciales mediante el cultivo de nudos durante tiempos cortos (2-3 semanas) y Recuperación Descongelación Congelación PVS el uso de la técnica de Encapsulación-Vitrificación (ensayos preliminares con ápices sin congelar). RESULTADOS Y DISCUSIÓN Genotipo 2 Semanas 3 Semanas 4 Semanas 5 Semanas MCOL1939 17,78% 16,70% 0,00% 21,85% 1. La evaluación inicial de los puntos críticos de la metodología de MECU165 30,00% 0,00% 0,00% 3,33% Encapsulación-Deshidratación muestra que las fases de pretratamiento y secado en el proceso afectan la respuesta de los MCOL1468 37,50% 0,00% 0,00% ápices disminuyendo su capacidad de rebrote. MBOL3 38,10% 73,90% 0,00% 31,11% MCOL1438 0,00% 0,00% 0,00% 0,00% 100 90 80 15 minutos 30 minutos 45 minutos 60 minutos 70 % V % B % V % B % V % B % V % B 60 50 40 MBol3 100a 95ab 82.5ab 82.5ab 67.5ab 67.5ad 71.67ab 56.67be 30 20 MCol1468 45bd 30cf 45bd 15ef 60ac 25cf 85ab 25ef 10 0 MCol1939 100a 100a 100a 100a 85ab 80ac 59ac 59ae Encapsulación Encapsulación- Pretratamiento Secado Congelamiento Recuperación MEcu165 95a 75ad 100a 95ab 95ª 95ab 85ab 60ae MBol3 MCol1438 MCol1468 MCol1939 MEcu165 MPer205 20cd 20ef 15cd 15ef 5d 5f 20cd 20ef 2. La respuesta en porcentaje de brotes, a menores tiempos de secado en sílica gel (10,16,20 y 24h), es baja en todos los tratamientos El análisis estadístico mostró una interacción significativa entre los tratamientos y los genotipos para las dos variables. después del congelamiento. PERSPECTIVAS 3. El aumento del tiempo de tratamiento con sacarosa (4 días) a diferentes tiempos de secado (6h, 20h y 24h), causa efectos letales • Evaluar nuevas condiciones de pretratamiento y secado usando la sobre los ápices congelados. técnica Encapsulación-Vitrificación. Porcentaje de formación de brotes