-- -~; \ \ . ~--\ c·~ CICJ.l) DE VIDA DEL 1IlilUTOOO QUISTE DE LA PAPA Globodertl. ptllids Stone EH EL ALTIPLAIID DE PASTO, DEPAllT.~Srrro D3 mnr;:o Par -.._ GUILLERMO c:~ICEDO DIAZ / ~ ] ·4 ... '],,.,. JOSE CAlIAL ALB.HI / :.l .;-,l Tenis de gm.do prezonti:.da eomo requi:.::ito p:u"cial v~-a. opt.3.r al tit ulo de IliGILi""ImO AG ROIIG\!0 ' J ITesi.d.antea de TesiS J'J.lf EmrE DEBS. I. R. EDGAR HISRUAlIDEZ I.A. J ~- C0opre~idc..~to de Tosi.a LUB A. HO.LIN.:~ V. I.A. f ' u_.IV~wI).: .. D :1.JZ !·'.; ! i:: :; FACUI.-r_\ll DE ClirlCI!S A·'.}aICJLA~ PASTO - COLOimIA - I 1'980 1 .. ... 5387' f.{ \ .... - VI - COHTENIOO Pag. I. INTRODUCCION ••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 1 II. REVISION DE LITlli{ArI'UR.A ••••••••••••••••••••••••••• 3 III. Wl.ATERIALES Y tGTO:COS ••••••••••••••••••••••••••••• 9 3.1. 1~1.ATEH.I.ALES •••••••••••••••••••••••••••••• • • • 9 3.2. MEIDDOS •••••••••••••••••••••••••••••••••••• 9 .. CICLO DE VIDA •••••••••••••••••••••• 10 LATffi~CIA ••••••••••••••••••••••••••• 14 IV. RESULTADOS Y DISCT.EION ••••••••••• ~···········•••• 15 CICT.uO DE VIDA•••••••••••••••••••••••••••••• 15 4.1.1. DUR1.CION ••••••••••••••••••••••••••• 15 E3TADJS•••·••·•••••••••••··•••••••• 15 4.1.2.1. HUE'lOS ••••••••••••••••••• 15 4.1.2.2. LARVA•••••••••••••••••••• 21 4.1.2.3. :ESTA.DO ADULTO •••••••••••• 30 4.1.2.4. QUISTE ••••••••••••••••••• 34 4.2. LATEIICIA •••••••••••••••••••••••••••.• ••• •• •• 36 v. CONCLUSIO~"'ES Y ~IEll.DACIONES ••••••••••••••••••• 40 CONCLUSIONES ••••••••••••••••••••••••••••••• 40 RECOI~IDACI01g$ •••••••••••••••••••••••••••• 40 iiwt;i.~! .......................... • • • •• • • • • • • • • • • • • 43 Su!mARY •••••••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 45 ~HI. :BI:E::LIOCat FIA .............. ~- .. ,, • " .... , £,.. ............ . !':... p-:c:.:ll I CE ••••• ,,. ••••••••••••••••••••••••••••••••• • • 49 - VII - ILUSTRACIO!IBS Ng. FIGURA 1. ELurREADOR OOSTElIBRINK PARA SEP. ARACION DE LARVAS DE Globodera. oo.llida Y NEMATO:OOS ~~- '-.... ' FILIFORMES ••••••••••••••••••••••••••••••• 11 FIGURA 2. ELtrrREADOR DE FENWICK PAP~4. SEPARACION DE • QUISTES DEL NEMATODO QUISTE DE LA PAPA Globodera nallid.a •••••••••••••••••••••••• 12 FIGURA 3. CICLO BIOLOGICO DEL NEMATODO QUISTE DE LA PAPA (Globodera pallid.a) ••••••••••••••••• 17 FIGURA 4. DISTRIEUCION Y J3IOLOGIA DEL NEMA.TODO QUI.2_ TE DE LA. PAPA (Globodera ;pallid.a) EVANS Y STONE•••••••••••••••••••••••••••••••••••• 19 FIGu..LU 5. In.JEVCS TIPICOS DE Globodera pallida MOS- Tru.1.T.00 EN SU INTERIOR LA PRIMERA FASE LAR VAL···••••••••••••••••••••••••••••••••••• 20 FIGURA 6. SEGT.JNDA FASE LARVAL DE Glo oodera pallid.a.. 23 FIGURA 1 •. DErALLE DE LA PARTE ANTERIOR DE UNA LARVA EN SU SEGU!IDA FASE, DEJ A1IDO OBSERVA R EL ESTILE11E PRINCIPAL CARAC"rERISTICA DE DD!. RENCIACION DE LA ESPECIE Globed.era ua.llida. RFSPECTO A Globodera rostochiensis •••••••• 24 FIGURA 8. LARVA DE· Globed.er~ ·oallid..3 EN SU TERCER.A FASE LARVAL, DJrDE SE HITC!A EL E11SAI{CBA- MT"k"'?·?rO DEL GlT~ ..' .E ''.'c:.' . ,. .. ~ ·. ~ .~ ~ ••••••••••••••••• CU.ART..\ FA.SE LARV~..: : ~·~ MA CHO JOVfill DE Globodera nallida ENROLLADO DENT.RO DE CUI'1. CULAS DE ESTADOS ANT3RIORES ••••••••••••••• 29 - VIII - Pag. FIGURA 10. CUERPO TLPICO DEL MACHO ADULTO DE Glo bodera. pa.llida. ••••••••••••••••••••••••••••••••••••• 31 FIGURA 11. BRiBRA AJJIJLTA DE Glo bod.era n!!llida CON SU COE..rtPO GI.DEOSO Y ADI!ERIDA A LA PARTE EX.TER- .. Nll DE UN~ RAIZ•••••••••••••••••••••••••••••• 33 FIGURA 12. QUISTES TIPICCS DE Globodera nallid.a •••••••• 35 FIGURA 13. COMP.ARACION DE VI.ABILIDA.D EN Q;JISTES NUEVOS Y VIEJOS •••••••••••• ~ ••••••••••••••••••••••• 39 - :IX - TABLAS Pag. TABLA I. LONGITUD DEL SISTEMA RADICAL DE PLANTAS DE PAPA, EN RELACION OON LA DURACION DE LOS Dli'R.liEI-ti'ES ESTAOOS DEL CICLO DE VIDA DEL ~"1.A1IDOO QUISTE ••••••••••••••••••••••••••• • • - 16 TABLA II. DURACimr DE LOS DIE'EREi·.fJ?ES E3TA:OOS DEL CIC7u0 DE VIDA DEL NEY...ATODO QUISTE DE LA PAPA ••••• • 18 TABLA III. PROMEDIOS DE MACHOS EH EL SUELO Y HE!!BR.AS EN LAS RAICBS A PARTm DE .LOS 56 DH.S DE LA SIE?l BRA DE PAPA•••••••••••••••••••••••••••••••••o 37 TAELA IV. ECLOSION Y MAXIMA ECLOSION DE QUIST:E!3 NlIE"{!OS Y VIEJOS Df!3PUF.S DE LA SI.EMERA DE PAPA •• •• •• • I, -y .. -· ;,_c"''' ""·:-""' ! -'h~ -. : 'i"·"-~*f-~_'.*;':7'1" ·~0~~~·¢'!!!1\if;.,:->•:;;: ,~•"'$.- - -~(££/)4"0;·:_*'?f'tJ%:~-:"{~;;':""f;;hfi~;.~;/~~~Ji.~" ;~''.~~, ,.,_,..,.._ "* ;;,. -- ., ,. - <; ~-"~ ~~\::>:;:'.-.., ~-- ,f - - ·-,: f~,_."_, ~ " -X- APENDICE Ptg. TABLA I. MACHOS Y HEM?lHS PROMEDIOS POR 100 GRS. DE SUELO A PARTIR DE LOS 56 DIAS Dt:SPUES DE LA SIE:i-IBRl.. •••••••••••••••••••••••••••••••• 1 TABLA ll. I B:ISAYO ECLOSION (Oostenbrink) LARVAS FOR 100 GRS. DE SUELO••••••••••••••••••••••••• 2 TABLA III. II EtJSAYO ECLOSION (Oostenbrink) L.ARVAS FOR 100 GRS. DE SUELO••••••••••••••••••••••••• 3 TABLA IV• fJ.'B!2>I s tJEI.,Q. • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • • .• • • •• 4 v. II ~!SL.YO (VIP..3ILIDJ...D) LAill!hS vrv~·~s POR 100 rrns/c:u: -~'i"R LQ Wl. ••••••••••••••••••••••••••••••••• 5 TABLA VI. ENSAYO DE L!T~1CIA ECLOSION {Oostenbrink) LARVAS POR 100 GRS. DE SUELO COMPARACION QUISTBS :m.m:vos - QUISTES VIEJOS ••••••••••• 6 TABLA VII. ENS! YO DE LATE!fCIA VIA.BILIDAD LA.RVAS IT.JA S POR 100 GRS. DE SUELO COMPiil"1ACICI~ ;,,,u'ISlES NUEVOS - QUIST'F!3 VIEJCS ••••••••••••••••••• 7 CICLO DE VIDA DEL NEi·!ATOOO ·QUISTE DE LA PAPA Globodera ntllid.a. Stone El\f EL ALTIPLANO DE PASTO, DEPARTAMENTO DE NiurrNO (+) Por GIJILi.~IO CAICEDO DIAZ - JOSE CAUAL ALBAN ! I. I1fl1RODUCCIOii Entre las or~~nismos fitop2.r1sitos ~s import~ntes que afectan el cul tivo de la pa.p:.1. en el De_parta.mento de Narine, el nenidtodo quiste Globod.era pallirb. Stone, cofu.~dido anteriorrn.ente en esta zona. oon Globodera rostochiensis Woll, se ha oonstituido en un problema eoon6- mico en alguna.s zonas pa.paras, principalmente de nrl.ni:fun.dio, donde las poblaoiones elevad.as dei nematodo aausan reduooi6n en los rendimientos. Debid.o a qua al descubrimiei~to dal nem.1.todo quiste en al Depa.rta­ mento de Narifio data ~e 1.970, la infcrmz.oi6n Msica es escasa y no axistan refsrencias sobre el ciclo de vid.a, las cuales tienen interes cie:-rtifico per el oo.!.ocimis.:'.lto de lc.s c:::.r:._.:.:-t::::risticas import~ntes de los iiferctltos ast~d.ios y el tie.w.~ de dur~ci6n ds ellos, a la vez qua ----------· ---.---. ------- -- ·- -----·-·- (+) - _~isito paroi~l p.::.ra opt~r al ti­ .jo la J4'9Sid9!l~ia de Jan Er~~a D$eS I.R., :fil%-ar Ifarnilriez I.A. y coopresidencia de Luis Alfredo Mo- lina V~lero I.A. M. So. per:niten establecer pr0£1T3.I!ln.S r~ciomles de control, mediante la ob­ tenoi6n de dates sobre eclosi6n, penetr2oi6n en el hospadero, laten­ cia de los quistes, etc. En base a lo expuesto, el presents trab~jo se re~liz6 con el fin de detcrmin:!r en condiciones de imrerx.dero, las difarentes fa.sea del ciclo de vida del nem1tod.o quiste de la p~pa, su dur~oion y c~racte- ristic~s mas im.port~ntes, estudiando .ta mbien el periodo de latencia de los quistes de Globodera Pallida Stone. II. RE'vISION DE LITERATURA Seg6n B~za.n de Sezu:ra (1), el nemitodo dor~do o nem1todo quiste da la papa Heterod.er3. spp, el3 oricin:::.rio de los Andes Sur a.merico..nos. Se presume que esta or:;aninmo p3.s6 a Bu=opa con los pri.meros envioa del tubcroulo en el a.fio 1.600 a.pro:d.raadamente y dado que los paises dal viejo contL~ente fueron los principales proveedores de semilla de pa.pa. en. el siglo XVI, se F~ede pensar q_ue fue el centre de dice;:iLii.a­ cion m3.s importa..."'l:te de aste parasite. Baeza (1.972) citad.o por Benavides y Rueda (2), :report6 la pre­ senoia del nem2:tod.o quiste en Colombia. a fim..les de 1.970, siendo en­ . i contrad.o por primera vez en el Dep3I"tamento de Narine y lo denomL"lO cono nem!rtodo d.or3.do. de la :P:lIO-• En el afio de 1.971, el Institute Colonbiano A£Topeou::rio detsrmi n6 la d.istribuci6n amplia del nem1 todo g_uiste an las zona.s papera.s de los De};Xlrt~msntos de Narino y Cauca. Exp·arimentos posteriores en Nari • • t ~-. no, demostraron que en las zonas de minifundio, existian niv eles de infestaoion superi.ores a 100 la.rva.s per gra.mo de suelo, ocasionando perdid.as entra el 25 y 57% de la producaion y, mediante el empleo da nematicid~ los rendimi.a.??tos de la pa.pa se incrementaron entre 8 '3 18 tonelc.d.:!.s :par hectarea {16, 17, 18) • . Stone (1.973) ·~it2C.O par J3..::mavi~ies y Rued.3 (2), report6 la e...>cis­ tencia de Url.3. nueva. especie at~~~~ .. ndo a la. papa y la. denom.Lri6 Heterode !:fl n2llid2.J so·:.,'Te la Cl.L'll ya se tenia conock.L.nto. Dicha. especie ss c.s.rsoteriw. par taner hem1n"2.S bl&-ic2.S o de oclor crsm, a.dem!s de que el estilete en se~-unio estad.o juvenil, es mas largo q_ue el de 1h ~- tcchiaru3ia. -4- Estas ce.racteristicas d.iferenciables son tambien mencionadaa par Oydvin (19) y Jacob y·van Bezooijen (20). Sin emrorgo, Stone, citado per Benavides y Rueda (2), d.iferencia a l!.!. rostoohiensis y H. nallid.a par las siguientes oaraoter!sticas del segundo estado juvenil• !k_ rcstochiensis - fu. pa.llida Long. (micra.a)' Eztilete 21.1 - 22.5 22.8 Bulbo eso:f'agico medio a. poro excreter 29.0 - 33.6 36.6 - 43.2 Punto de la. oabeza. a ::poro excretor 98.1 - ' 102. 9 104.S - 112.7 ~ ' Long. cola Long. larva 448.B 463 - I .I l· -5- BGnavides y Rueia (2), indic2.Il que el color de loo quistes no d..!:, tormir..a. um diferoncia entre especies de Globodera, anteriormonte in- cluid.3.s dentro del g!foero Heterodera, sino que es una caracter!stica cond.icionad.a :por la ed.a:d del oultivo. Al estudiar el oomporta.miento de oinco d.ife renciales holandesas de :pa.pa para pa.totipos del nematodo quiste, en suelos infestados de·, Narifio, se enoontr6 la presencia de los patotipos "D" y *'E", gue se­ .. gUn la clasificaci6n holandesa, corrss:pond.e a la espeoie l!!_ Palliful. (18). El color blanco de las hem bri3.S adul ta.s, adherid.as a. las raices de la. pa.pa, las ca:rac.te:dstioas morfolo.gioas de los esta.d.os juveniles y el gTnd.o de ata.que en las d.iforcnciales holand.esas p-J.ra pQtotipos, confL~a.n -Ja. p.resenci:l. de H. rollida en :Narifio {18). U:l pred.omi..TE.ncia y distrib uci6n de 1h, uallida en los Andes stio"'1.e­ re que es origina.ria de esta. regi6n1 debido a. q_ue ha. sid.o naceoe.rio muoho tiempo para que un mutanta se haga predominante en forma natu- ra.l (4). En 1.975, Mulvey y Stone (15), ubie3.ron a las es:pecies Heterod.era rostocl!.ier~is y Heterodera 1Jallid..3.., dentro del genero Globod.era, el oua.1 segU.n Jacob y Van .Bezooijen {2o), tiene la siguiente ola.sifioa- ci6n taxo:iorn.icc... l -~,.,..··. -,I -' - 6 - REil!O: Animal StIBP..Eil~O: Metazoa RAM.A: Enterozoa DIVISION: Bilateria .• _j SECCIONJ Pseud.ocoelomata TIR:>: Aschelmintes CLASE: ~rematoda. SUBCLASE: Phasoi.dae CRDEN: Tylenohida. SUOORDEM: ~Jlenchina SUPERFAMILIA: fylenohoidea. FAMILIA: Heteroderida.e SUBFAMILIA: Hetaroderinae GfilIERO: Globodera; Skarvilovi.ch, · 1. 959. E3FECIE: Globodera rollida Stone, 1.973. Mulvey y Stone (15), describen al genero Globodera. asi: Hembra. ~ dura y quistes de form.a esfarioa; vulva eon longitud manor do 15 mi­ cxas. El segundo esta.do juvenil tiene estilete menor de 30 miara.s y el ma.oho tiene una. lono"1.tud promedio de 1,5 mm. - La. parte hialina de la cola de la larva es mas larea que el eati- let~; la distancia entre ano y vulva es mas o menos dos vecas y media el diametro de la -vLll.va (22). Lo::. machos son filiformes, 1,25 a. 1 175 mm. de lon.:;:ttud1 con cola corta y red.ondea.d..:t.. L<;,.; la!9",,-a.s tienen una lor.i.;i tud. promedia de 0,5 mm. I L •. (13). - 1 - Ellis y Heoling (7), obse~i.;.;Xon mayor viabilidad del estado lar val an -G. nallida. a-ue en -G. -ro-s-to-ch-i-on-s-is-. Evans y Franco (8) anotan qua en Colombia, Ecuador y pa.rte del Perd solamente fu. Pallid.a ha sido encontrad.o; sin emoorgo, _fh. pallida y ~ rostoohiensis han sido observados simul tanea.menta en el Sur_ del PorU. y Norte de Bolivia. El CIP cit ad.o par Nieto (18), dica que aotualoonte .Sh_ ;?>Jlida y ~ rostochiensis se encuentra.t1 disemim.das en varios paises de Euro- pa, .America del Sur y en el rasto del mundo. Webster, cita.do ,lX)r CIP (5), a.grega. que un solo quiate de Globo- ~ spp. oontiena de 200 a. 500 huevos; sin embargo, solo cierto por­ centaje de huevos eolosiona. cad.a a.no, pero los restantes puedan que­ dar via.bles por 2C o 30 afios dependiend.o del sistema. de cultivo. Parrot y Berry, oit a.dos par Clarke ( 6) , a.fL.""man qua la. aolos i6n de Q:. pa.llida, es manos freouente qua Jh rostochiensis en alt a.s. tem­ per:;. tura.s debido posiblemen-te a. su adapta.oi6n a~ pa.paras eleva- d.o.s. El nematod.o quiste de la papa, presenta. problema.s inu;y dif'ioiles para su control lm3. vez qua su presencia es observada., d.ebid.o a. las oa.raotGristica.s bio16_;icas de este orga.nismo, que le pr-'-rmi ten :persi.s­ tir indefinidrunent.a en el suelo en ausencia de un hOsped.a.nta {12) • ... ~:...i t:x.J.>.~·>"' ..: . .•· n:"."·:..:·:·~"'.'·-.L.~:: .~.,_.:.7f.J J..:.~.~n.::i:l de quistes de~ pallicb., Unic:-...: m•;nte &.i~2r y Fisher, citn.d.os por Clar-eke y Perr.1 (6), a.fir.man qua la. latsnoia de quistes de G. rostochic.~is es :probablernante aso- - B - oiad.3. con un cambio fisiol6gioo en el segundo estad.o juvenil y la. te£_ min:!ci6n de la quiescenoia es debida a baja.s temperaturaa antes qua a. un meoanismo end.6geno. Sin embargo, Kaul citad.o por Clarcke y Pe­ rry (6), atribuye la inhibici6n estacional de eolosi6n de Jh_ rosto­ - l ;'·~ ohiensis; a la presoncia de una sustanoia pega.josa prasente en la. pa­ red del quiste.' -- .l j III. MA TERI.ALES Y MEI'ODOS 3.1. MATERIAL"B.S. Sa utiliza.ron los aiGUientea: ·Reglilla microm~trioa, suelo del Galeras libra da nematc>­ dos, vidrio raloj, tubos de vidrio, :Beaker da 50 y 100 mililitros, Elutread.or de Oostenbrink (para separaci6n de larva.a), Elutrea.dor de Fanwiok (.para.separaci6n de quistes), caja·:para.oonteo de quistes, ca­ ja. :p.-3.ra oonteo de iarva.s y huevos, holnoge."lizador de quUt.es, :filtros a.a algod6n, tamicas · de 175 a. 250 mioras ~ ta.mices de 45 micra.s, em budos ~ papal filtro, maoateros de plestioo de oapa.aida.d para 250 gramos, bol­ sas de muselina., tuberculos de papa. ( tamaiio 3a varied.a.d IC.A. Chantala), poblaci6n de quistes la Laguna., balanza para pesa.r suelo, mecherot li­ cur;.dora., microsco:pio y esteroscopio, bal6n a.fora.do a 500 mililitros, la.mi..?la.S porta. y cu.bre-objetos, aceit e de inmersi6n, aztU de algod.6n, agua destilada., !aido propio!'.ioo, formol 4% y glicerina.. Este estudio :rue rea.lizado ba.jo condioionea de invernadero en la Gra.nja Experimental de Obonuoo del Instituto Colombiano Agrope­ aua.rio (I.C.A. ), la. cua.l esta sit ua.da a 2. 710 m.s.n.m. con una. tem.pe­ ra:tura prcmedia d.e 13,lgC y una precipitaai6n pluvial de 900.5 m.mja.no+. El traba.jo se inicio en Enero de 1.979 y f'i.."'la.l.iz6 en Octubre de 1•980: + D~ 1 tc;.:: Si~ niui~- tr·J.Ll.os yor la. Estc.ci6n Metereologica del I. C. A. Obonti- co, Pasto. - 10 - 3.2.1. Ciclo de Vida.. Se establecieron dos ensa.yos, en el pri.mero ae rea. lizaron observaoiones cada 8 d!as y en el segund.o oada 4 dia.e; en es­ tos dos experimentos se determin6 el ciclo de vida de la espeoie Glo­ bodera Pallid.a Stone, observando los oambios ocurridos en los diferen tes estadios, utilizn.nd.o 50 observaoiones para cad.a estado. P3.ra cad.a ensa.yo se utilizaron 100 maoetaros, cad.a uno oon 250 o.o. de suelo li bre de nematodes, mas 3 gramos de fsrtili~te bien distribuido. En el suelo de cad.a ma.tero, se mezclaronuniformemente quistes via­ bles para. un total de in6culo .. de 5.000 larvas. Posteriormente se sem­ br6 un tub~roulo de papa. de tercera var:ledad 'ICA Chantala per matero. Simultaneamente, se macer3.:ron quistas oon ayuda dal homogenizador Ruijsman p:lra la observaoion y medioi6n de huevoa, oon la ayuda. de una re0lilla micrometrica y utiliZ3.ndo al microscopic a 100 x y aceite de inmersi6n. A partir de la inocula.oion de los quis-tes con el sualo, aa hicieron observa.ciones a 5 ma.taros cad.a 4 7 8 dias. En oada observaoi6n se tomaron 100 c.o. de sualo para. ha.oar oonteo de la:rva.s segQn el metod.o de Oostenbrink (Figura 1) (20). Los 150 c.c. resta.n­ tes se procesa.ron segtln el metodo de Femdck (Figura 2) ( 20)' para de termina.r el ntimero de quis tes y au via.b ilided efectuando un anilisis de correlacion (3). Para las larvas eclosiona.das se efectu:iron las s,i guientes medioiones: Lonc,~tud total, ancho (poro excretor}, longi.tµd cola (pa.rte hfa.1.L"la), lon:--;itud cola, an.oho oola, anillos oabeza, alto --;;~~>'.~:.}; .. t.!'''_;.":;. ,;:;_~,~,_,_.·-:--~ '.0~_-i'.:.~,;.;.:;. ::-rtilet-3, 02~beza. - bulbo med.io, bulbo medio - IJOro a.x:c..-r~tor, cc:l'3zr.. - poro excreter y cabeza. - rose estile- ta. - 11 - ~i~t1 f~ •. •.· ~ ""·: r ·-- --~ ~ .... Figura 1: Elutreador Oostenbrink para se­ :paraoion de larva.a de Globodera nallida. y nematodos filifo:rmes. Foto: Jan E. Deas. - 12 - I i ~ I --..:..__ : ---~ l ! E .. ----- ~ Figura 2s Elut:reador de Fenwick para sa- \ paraci6n de quistes del nemat_2 do quiste de la. pa.pa Globodera Fotoi Jan E. Dees. - 13 - Despu6a d_e analizado lo anterior, se hiciaron o baer vaciones de tejid.os radical.es al esteroscopio, madiante oortes y maca­ ra.dos da raices ln.vada.s para determimr penetraoi6n y looalizaoi6n de las 1arvas·an su sesundo, teroero y ouarto estados juveniles. En el mi croscopio se observaron c.:unbios de mud.as, su dura.ci6n y ca.ract.eristi­ cas morfol6gioas y se hicieron medicionas. En el cuarto estado1 se realizaron observaciones sobre la diferenciaoi6n morfologioa. de saxos. En la'hembra. ae determi­ n6 la forma.ci6n de hueVOSt median.ta la disecoi6n de ella, asi COIDO SUS oaracteristioa.s mas importantes como: Lo.n,p:tud. total, ancho total, lon git ud de cuello y ancho del cuello • Una vez calculado el tiempo de du­ raci6n de la hembra per-,;a.da a la raiz, ae hicieron observacionas sobre su tra.r~formaci6n en quiste, asi oomo los cambios de coloraoi6n y dur~ za. de la. ~ticula; mad.ia.nte.determinaoiones diraotas en la raiz. Los ma.ohos ad.ultos, se sepa.ra:ron del suelo por el Elutreador de Oostenbrink y se realiza.ron las sig.tlentes medicionasa Loll:.ioi.tud total, anoho (poro escretor), ancho cola, alt o oabeza., anoho oabeza, lo.ngit ud estilete, ca.beza-bUlbo medio1 bulbo medio - poro ascretor, oa.beza - poro esore­ tor, cabeza - base estilete y longitud de la espicula. Para la observaoi6n de los diferentes estados, se hicieron tinoionas oon la t~onioa descrita por Jaoob y Van Bezooijen (20). En oa.da tmo de.los estados se determin6 la longitud del sistema radical de las plantaa y para cada una de las obser-nciones se deter­ min.6 la desviaci6n stand.3rd (21). - 14 - 3.2.2;- Latencia. Se oolooaron quia.tes recien formad.os y viejoa, pa­ ra un in6culo total de 5• 000 larva.s por maoetero en 100 ma teros, ha- ciendo comparaoi6n de eolosi6n de larvas y .su viabilidad oada 15 -dia.s hasta el memento de eolosi6n; para luego afectuar lecturas cad.a 8 dia.s d:urante 82 dias. C.. on el fin de establecar la asocie.oi6n entre el ntimero de dia.s despu~s de la siembra, con el promedio de la.rvas eclo­ sionadas, se efeotu6 el analisis de correlaci6n (3). \ - ' IV. RESULTA:lX)S Y DISCUSION 4.1. Ciolo de Vida. 4.1.l. l)uraoi6n. El namitodo quiste Globodera ptlli~, req_uiere da 88 a. 91 d.ias (Ta. bla I), desde la :primera fase larval a su estado adul , to final. qua es el quiste (Figura. 3). Este nematcdo se desarrolla. a trav6s de los esta- dos de huevo, larva y adulto, pa.sando por la prim.era., segunda, terce­ ra y cua.rta :f'ase larval y por Ultimo adulto (Tabla ll) {Figura 4). 4.1.2.1. HueVos. Loa huevos oomo se observa en la. Figura. 5, se forman dentro del cuerpo de la hembra. ya. fecund.ads., son hialinos da c - ~ • • --f'orma. reota.ngular u ovoide.- Se los encuentra inioialmante en una :fase I monocelular, con dura.oi6n de 1,5 d.ia.s; luego pa.san a la. :primera .f'a.se larval, la cual dura 2 dias y se observa. la formaoi6n de la larva en­ rosoada y dejando un espacio o oa.ma.ra de aire dentro del huevo. Poste­ riormente ocurre la segunda fase le..rva1 a.Un. dentro del huavo, la cua1 dur.a 2 o 3 dias. A continuaoi6n ocurre la eclosion, en la cual se o1:;serJ"6 la destrucci6n de una pa.rte lateral del huevo y la sa­ lid.a. de la ca.beza ds la lc.rva hasta el bulbo esofagico medio, quedando el resto d.el cuerpo onr~ilad.o internamente, Pnr"2. lu0Q""O salir completa- - 16 - TABLA I LONGITUD DEL SISTEMA RADICAL DE PLANTAS DE PAPA, mq RELACION CON 'J-iA. DURACION DE LOS DI~'.t!Li'.\ENTES ESTADOS l'EL CICLO DE VIDA DEL lm-i.rrooo QUISTE Esta.dos Raices :D:fa.s Promed.io ''~ .... (cmt) Primera.a La.rvas {Suelo) l - 3 6-8 7 I y II Estad.o Eclosi6n Larvn.s (Suelo) 10 - 15 6 - 36 21 Primera.s Larvas (Ra.ices) 10 -15 24 - 21 25,5 II Estado MWcima Eclosion 15 - 20 29 - _36 32,5 III Estado (Ra.ices) 20 - ·25 39 - 41 40 IV Estado {Raices) 20 - 27 47 - 48 47,5 . P:rimera.s Hembras (Raices) 20 - 27 48 - 50 49 Pri'.neros Machos (Suclo) 27 - 30 55 - 56 55,5 .. Quisias 30 - 35 88 - 91 89,5 ~/. \ . - . '" ' ' ' -· .. '"- ti' Ma'xuno E clo11o'n lit Estodo Est ado Adu I t·o E CLO SI 0 N 3 L ARVAS X 100 Qr. de 1uelo 100 eo I • • ···~ 10 20 30 40 !50 60 70 80 90 100 DI A S 0 E.S P U ES 0 E LA SIEM BRA ftGURA 3 CICLO BIOLOGICO DEL NEMATODO QUISTE: DE· LA PAPA, (GLOBODERA PALLIDA) - 18 - TABLA II DURA CION DE LOS DIJ:l~EJ:·rl3E5 ESTAOOS DEL CI CLO DE VIDA DEL 1i"'E!UTODO QUISTE DE LA PAPA ~ ES TAD I OS DIAS PROMEDIO CAM.BIOS CUl'ICULA Huevo - 1~ Fase Larval 1-2 1.5 1~ Fase 2g Fase L&-val 2-3 2.5 1e Mud.a 2~ Fa.se Eclosian 2-6 4.0 2a Fase 3~ Fase Larval 33 - 35 34 ~ Mud.a. )f! Fase 4~ Fase Larval 7 - 8 7.5 3~ Muda 41! Fasa Estad.o Adult o 2-5 3.5 41 Huda Renibra_ Quiste 40 - 50 45 Hembra Color Blanco - Crema. 23 - 24 23.5 Color Crema - Marron 24 - 25 24.5 Color Blanco - Marron 49 - 50 49.5 u I. W • Bil I I I P I I I I I I 2 t I JIU I. I IUIJbUIHllJUSll llUJ! IJt 4MlllP!lll H UEVO fiJ, . ~--------.. / ~ I • ·.t~:·:~(~~~\~ _;;u;>...rte hia.lina. Lon.;i tud cola x .55,55 -+ 2,35 Amilio cola X 13, 72 -+ 0,56 Anillos oabeza X . + 4,16 - 0,37 Al to 03. beza. X 4,83 ! 0,72 Ancho oa.beza. X io,53 -+ 0,77 Lonr~-itud estilete X 23,8 -+ 0,84 Cabeza - bulbo med.io X 70,16 ! 4,71 • llulb o medio - poro excrator X 34,12 -+ 2,ll I Cabam - poro exoretor X 103,12 -+ 4,84 Cabeza - base estilete X - 26~74 !. o.58 Su duraai6n tiene un promedio de 34 dias {Tabla II). Esta estadio ha servido oomo base p.:Lra la identifioaoion y oomptl.Taci6n con lh_ Mstoch.iGnsis, por las medidas d~ las siguientes ---------- -·-- -----------·------ ---- -· Figura 6: Segunda fase larval de Globodera. pallid.a. Foto: Jan Eo Dees. - 24 _, "4 'I I ~1 i l . ~ f'r.' ( " \ • . ·. • .f .... t Figura 7: Detalle de la pa.rte anterior de una larva en su segunda. fasa, de- jando observar el estilete p~inci p3.l caracturistioa de diferencia- -G-lo-bo-d-er-a Dt:L i ...,.............,_,. ...... _ ~· Foto: Jan E. Dees. en _£h pallid.a; por la dimension del estilete principalmente. El segti_£ do astado inici~lmcnte perrnaneoe.incrustado en la raiz, qued.::.ndo la mitad de su cuerpo por fuera de ella., luego penetra oompletamente pa­ ra continuar con au ciclo de vida. Dospues de la invasion a las raices, el segJndo est~do juvenil migra a trav~s de la corteza radical y asume una. posici6n alimcnticia orientada paralelamente a.I oilind:ro v~sou­ lar. El d:ifio mechico de las pared.es celulares y alguna.s necrosis P'.J.!:_ den ser vistas a traves del movimiento de la larva.. Sais d.ia.s despues de la. inva.si6n las o6lulas se fuoionan a.lrededor de la caheza del ne­ matodo y se produce una. va.cuolaci6n del citoplasma. (10). _:1 Evans y Stone (9), reportan qua el ~ es ta.do jU""vcnil invade la raiz carca al punto de crecimiento, eventual- mente introduoiendo el estilata y rampiendo las celulas cortica.les pa ra. inicia.r su a.limenta.ci6n en la. endodermis, y siguiendo hacia el pe­ riciclo. A..:;regan que los machos despu~s de la emergencia del tercer estado dejan_una cuticula, aba.ndonan la raiz 7 apa.rentemente se a.uto­ alimentan; la. hembra ruptura la. corteza. de las raioes al forma.r su cuerpo esf'erico y se adhiere por la eabeza y el ouello a la ra.iz, eaj, tiendo una secraci6n la cua.l atrae a los machos, los ouales realizan la £eou.:."ldaci6n. La panetraci6n de la la....~a causa alguna.s necrosis a.~ la corteza de la r~iz, las pe..redes celulares se vuelven (__ :fusi6n ;_l.9 celul3.S; cmndo ls. 10:7a Ll'l&t'GSa al oilindro vascular ini­ oia. SU u.lir:i.entacion e L"zyecta U..?la, especie da saliva a las oelul~s, la I cual hace que aumenten -~e ta.mano y se forma.l'l. 0 o&lulas gigantes", el nucleo se a.larga. y algimas vacuolas se a.cortan agrupandose en al pr.2. toplasma (11). Al finaliz-ir esta. f'ase larval se observa ran cambios de cuticula y las raices alcunzaron UI'U1 longitud de 10 a 15 omts (Tabla I). .. Tercara Fase Larval: La caracteristica principal para el reconocim.iento de esta fa.set fue'un ensanohamiento en la p:u-te media. del cuerpo, debido segr.Sn Huijsraan (11); a la alimel! tuci6n y desa..-rarollo de esta estado {Figura 8). En la raiz se observ6 araarille.miento en las oel.ulas y algunas necrosis de color marr6n alre dedor de la penetracion de la la-.-r-va. En este estado Trud.gill (1.967) citado por Evans y Stone (9), afL~ gue se puede siti~<7llir el sexo del nema todo; sin embargo, no sa pudo determina.r esta di.ferenciaci6n d.ebido a. ca.renoia de sistemas de tinoi6n. Dimensioness Objetivo 100 x 1,4 ll Jll 50 Lollc--itud to~al X 399,15 -+ 36,32 (micra.s) Ancho total X 58,13 -+ 12,34 - 27 - .. ----- --- _) Figura. 8: Larva de Gl o bodera "Oal 1 ida en su tercera fase l~""Val, donde se inicia el ensanc~ mierrto del ouerpo. Foto: Jan E. Dees. - 28 - Su duraci6n tiene, un promedio de 1 dias, y al fina.liza.r este estad.o se observ6 un cambio de cuticu.la.. La lon.::;itud de las raices cuand.o la larva lleg6 a este estadio fUe de 20 - 25 cmts {Tablas I y II). Cuarta Fa.se larv-co.l: Como ca.ract~istioa .~ im~rtante de es ta fase' es la diferenciaci6n de sexos' la cua1 se reconoce p::ir un mayor ensanch.a.miento en la parta_ ventral de la hem brs., mientras que en los machoe ocurre un aiargemiento y se alc.J.I'l...za a observar su for.mz..cion dentro de las mud.a.a anteriores (Figura 9). Desptws de deja.r la ct..~icula o mud.a, el maoho en estado filiforme, em piza arondor..:ir la. raiz y se dirige al suelo, donde se observa un movi miento mas le.11to qua en el segundo esta.do jt.."Venil. En le.s hembras se a,Precia el estilete y ocurra una. distensi6n cutioula.r, toma.ndo una f'orma globosa. Dimensionas: Objetivo 100 x 1,4 N = 50 Machos: Lonp.tud total X 400,48 -+ 25,10 {micraa} Ancho total X 69,01 -+ 9,08 Hem bras: Loru_;i. total X 361,48 -+ ~..id Anob.o total X 119,33 +- 24,31 - 29 - _,,... .. ' I Figura 9: Cuarta fase larval de ur1 111a.oho joven de Globodera ne.llid.a en- rollad.o dentro de cuticulas de :_,~ ..~ dos ant er iores • Foto: Jan E. Dees. ~~ rei=od.uotiv.>:l ~ l~ ·~-ulva en le. hrul.n:u1 oitttib, ~:t::l c.l a..~ 3 b::.jo lZ!.:l ®~~ion mr:;r.;r:::i~=i en ln. p::.rt3 rx;at~lc::'. L::.n an,Z;l!ou- 1~~ ro ~ ~'lo con J?r.~1.:i.'.--,rl::.:; y oct!n cit u~ c:.~ cl e..~ on l.;3 - __ , J.. ;J .!...),..}• Obj~iw 100-x l,4 - i.074,30!. .;~~"U~ ~ ~~~tor x ., ... ..,,,.., + ..., ,.,, j.:;. - 6,14 ... .,&. l ._"',l _,,"..!.,C.,,' c,::n. ·,_ 149,19 + n,;5 .. 30;)? - - 31 - ... _. _____ ·--·------- ------···----·----- ---. --------·---·-- --- ·-- ------=-~ Figura. 10: Cuerpo tipico del macho ad4 to de.Globodera nallida.. L~s primeros ma.ohos a?:trecen a partir de los 56 d.ia.s~ su cuer:po es traslucido y de movimierito lento, la duraoi6n de este estado es dificil determinarla en forma endoparasi­ ta. Las raices tuvieron una longitud de 27 - 30 cmts. {Tabla I)o Rembrass La ,hembra se JLL~cha y sale de la raiz rompiendo los tejidos, se adhiere a la. pc.red de la m.isma por el ouello y es fertilizada. per el macho (8). Son sed.~nta.rias y su­ f'ren una distenci6n del ouerpo, adquiriendo final.manta form.a. esf~ri­ ca (Figura 11). Al principio son de un color blanco '1' a.1 ~~rir se fo~ los quistes. El promedio de hembra.s en las ra.icea fue nuyar a.1 de los m'lohos (Tabla III), ha.sta los 88 dias; de a.hi en adelat.~te al promedio de ma.ohos en el suelo fue mayor debido a. au mi­ graoi6n a.l substrata (Tabla III y Tabla I del apend.ioe). ' Dimensiones: Objetivo 25 :x 5.5 Ii = 50 Longitud total X 736,73+! 57,95 Ancho total X (micras) 575, 72 +- 53,37 .+ Lono'"'1. tud cuello X 146,0l - 26,46 Ancho cuel.lo X 88,11 -+ 16,68 Las primeras hembra.s aparecen a partir de los 48 dias y tuvieron una dura.di6n,promedia: d.e 45 dias. ia. lon- gitud de las raices en este estado fue de 20 - 27 om.ts. (T2bla.s I y II). I - 33 - ,--· - .. -- - - ----- ------ -- • I -~ , ---~ Figura ll: Heobra. adulta de Globodera nallida oonsu cuerpo c;loboso y adherida. a la pa.rte externa de una ra.iz. 34 4.1.2.4. Quiste. Los quistes son de un color pardo roji zo, oaraoteristioo del genero Globodera. El oolcn: y tamaiio de los quistas son variables, la outicula se convierte pn una capa. resisten te; que permite la persistencia. en el sualo por yarios ~·;)S de-lOS hueVos y larva.a tanto de la primera como de la s#fr.:mda fase larval (Figura 1·2) •· El tiempo de co.mbio de coloraci6n del quiste de bla.nco a crerna. fue de 24 d.fus, de crema a. marr6n 25 d.ias y e.e bla.nco a. m_qrr6n 49 dias_ :(Tabla II) •. La lono7i~ud da las ra.ices cuan do 1a hembra se enquist6 fue de 30 - 35 cmta. (Tabla I). En el :primero y segundo er..sayos, la ma xima. eolosion ocurri6 a los 36 dias despues de la eiembra. (Tablas II y III apendice), pero no existi6 correlaci6n entra el tiemp..:> despues ' de la. siemb ra y el pro.msdio de la....--vas eclos ionadas. · La eolosi6n pueda deberse m!s qua tod.o a oondiciones ambientales del suelo que la f'avorecen, sin tener una certez.a. de que en determina.do tiempo ocurra la misma..- -il declinar el oultivo, ocurre menor eclosi6n de la...--vas (Tablas II y III apendioe), lo mismo que cua.ndo se Tealiza la siembra ya que no hay cxudados de re.ices que favorezoan este fen6meno. (Tabl~s Di y V apendica). ···---·... - IEt! - 35 - _, f. Figura 12: Quistes tipicos de Globo~era nallid.a. ?oto: Jan E. Deeso - 36 - 4.2. Latancia.. Al hacer la comparaci6n de quistes nuevos y viejos, se ~ termin6 qua en las primeroS existi6 un periodo de latencia o quies- ·oencia de 28 dias, con una m1xitna eclosiOn entre 61 y 75 dias (Tabla. IV) y VI dal a}l6ndice misntras .;:ue en quistes iriejos no hubo latenoia (Tabla Fry VI del a.pend.ice). Sin embargo, la viabilidad fu9 mayor en ' quiStes nuevos (Figura 13) y (Tabla VII del ap9ndice). - 37 - ' - TABLA III rnm~IOS DE MACHOS EN EL SW_iliO y BUU3RAS El:! LAS RAICES A PARTIR D~ LOS 56 DIAS DE LA SIErtIB.RA DE PAP.A DIAS Promed.ios p. 100 grs. suelo 60 64 63 72 76 80 84 88 92 96 MACJ:OS 2 4 6 • 2 25 8 45 22 74 69 24 IIEMBRAS- 263 137 180 218 224 183 77 140 136 14 20 ----·- - 38 - -- ! T.t;DLA IV ECLOSIOM Y M!XTiliA ECL.OSION D~ QUISTES :.NU.ENOS Y VIEJOS DESPLT~ DE LA SI3:l•rnaA DE PAPA ----------~----------------------·--,--_..;;;;;-- Dfa.s Promedios Dias Promedios Eolosi6n 28 - 40 34 6-8 -7 Maxim.a. Eclosion 61 - 75. 68 29 - 36 32,5 . , . - m · - ~ - · - · - - - - · ' " " ·~ .,·; t '~ ·,::l ... _________________________________' ___ ;._ ___ ----·-~ Q UISTES N UEVOS QUISTES VIE JOS >~ -,\/ • 10 2 0 3 0 4 0 50 60 7 0 8 0 9 0 JOO DI AS OE S PUES DE LA SIEMBRA FlGURA 13 COMPARACION DE VIABILIDAD EN Q U I STE S N U E V 0 S Y VI .~ J 0 S V • CO:i:lCLIBIOl'IES Y RECONEIIDACIONES 5.1~ CONCLUSIOiiES. 5.1.1. En condiciones de i.'1.Vernadero ( en el Altiplano de Pasto, Depa.rta.mento de Narillo) 1 el ciolo de vida. del nt::>matodo quista de la papa. Glo'bodcra pallid.a. Stone, tuvo U..""l.a duraci6n pronedia de 91 di.as, desde el estado de huevo ht;.sta el estado de quiste. 5~1.2. El estado de huevo se Ol.l!IlI>li6 en 5 di.as, desda la fase monocelular ha.sta ccntener dentro le.s larva.a en su segund.a. fase. 5.1.3. El esta.do larval se curnpli6 a traves de cuatro fa- aes con sus corrsspo:ldientes muda.s: la primera dentro del huevo con duraci6n de 1,5 di~s; la segunds que eclosiona del huevo e invade al hospedero con duraci6n de 34 dias; la tercera faze larval donda :pa.re- ca iniciarse la diferenciaci6n sexu.11 con duraci6n de 7 dias; la Ctia.£ ta fase la...~al tuvo una duracion de 5 dias y permite d.ist~-ui.r los sexes. 5.1.4. Las oa..-v.otaristica.s morfol6gioas de la segunda fa.­ se larval principalmente de longitud del estilete, permits diferen- ci~r a Globodera ;pallid.a, del newntodo dorado de la papa. Globodera r~stochiensis. foZ"""~ GJ-obosa, color blanco creraa. y tien3~ u .-.. -n cltL~a.cion de 45 di.as. 5.1.6. Los machos sufren diferenciaci6n en la cuarta fase larval donde estan enrollud.os dentro de una cuticula; 1U9t::,'"'l'O salen al exterior y son filiformes. 5.1.7- Las hembras adultaa pasa.n al estad.o de quiste por _. endurecimiento y obscureoir.Jient? ~e la·cuticula para caer y pcrmane- oer latentes en el suelo. 5.1.8. Al h.a.cer las comparaciones de ecloci6n de quistes nuevos y quistes viejos, se deterwin6 que existe tL.~ periodo de laten­ oia o quiesccncia. en quistes nuevos de 28 dias, alc~nza.ndo l~ m1xiraa eclosi6n a los 75 dias, m.ientra.s que la. Yfa.bilidad fue nen0r en quis- tes viejoa. 5.1.9. No existe correl3.ci6n e!'ltre el tiem:;x> y ec.losi6n. 5. 2. RE·;}Clt:filIDACIOlr.ES. 5.2.1. Deter.mi..~ la. dura.ci6n de los machos adultos de 2• n.tllida. en el suelo. 5.2.2. Realiza.r ensayos sobre control quimicc y cultural de la segtmd.a fa.se la.rva.l desa.rrollada entre 6 y 36 dfa.s despues de la sierali-ra.. 5.2.4. Realizc.r recoa:;::::iL:isntos pori6d.icos sobre 13.s po- blaciones de na-nttodos fitorx:.rt~itoc, en l~s zcnas paperas del Dep::.r- ta.mcmto de Narifio. -.i 5.2.5. Er~yar plantas tr~m:pas sobre el nematode quiste de la papa y su. i.fu.~uencia en la poblacion de quistes. ! : VI. RESUMEN Con el objeto de oonocer el ciolo de vida dal nem~tod.o quiste.de la papa, Globodera nallid.s. Stone, se realiz6. el presente trabajo bajo 'condiciones de invernadero, en ~l Altiplano de Pasto, Departamento de ' .. Narifio, emplea.ndo materos con una capacidn.d de 250 c.c. de suelo seoo libre de nem~todos a infestado con 5.000 l~rvas por matero. Para el ciclo de vida se hicieron 2 ennayos cada uno con 100 ma- ceteros, con semilla de papa varied.ad ICA Ci..ianta.la de trc:m,-...fio 3e. A partir de la. siembra. se procasn.ron 5 materos cad.a 8 aias para el pri­ mer ensa.yo y 5 mn.teros cada 4 di.as en el sesundo ensa.yo, utiliza.ndo para cad.a lectura el metodo de Oostenbrink {saparaci6n de larva.a fili formas y machos adul tos) y el metodo de Ferrwick ( sepa.raci6n de quis­ tes del suelo). Con la ayuda de un esterceoopio y el microscopio, se hizo c~nteo y mediciones respectiva.mente de las diferentes fases del nemato~o. Se comprob6 ~ue el ciclo de vida. del nematode ~uiste de la papa. G. pallid.a., se desa.rrol16 en un periodo de 91 dia.s, pa.s:mdo por sus di:f'erentes estados qua son: huevo, larva en sus 4 :fa.sea larva.lea y adul to (macho y hem bra). El tiempo de duracion de las respeotiva.s fases fu6: huevo 1,5 d.ias, la:rv:'.l SG~l"lda fase 34 dias, tercera. fase 7 di.a.a; cuP.-rta fase 3,5 dias y adulto hembra 45 d.ias. ~ '1e utili:3.;.ron lOC mac~ viables :par 2::0 c.c. de suelo Jc:cc ;:- ::__,_; :i:..-.• ~ -'t6ros con quistes v::..~--~ .... -_, utili~n.:io la. :ni;;na. via.biliiad. Se am.lizaron 3 mac"teros de q_uistes viejos y 3 de quistes nuo­ vos cad.a 8 dias, y msdianta el conteo de l~rvas eolosionad!ls se deter­ min6 que los quistes nuevos tienen un periodo de latencia de 28 dias1 alcanzando la maxima. eclosi6n a los 75 diaa, mientras que los quistes viejos no t;uvie:ron late~cia. _, SUMMARY It was carried out this work to know the life cycle of the cyst nanatode of potatoe Globodera pallidaL Stone; in green house condi­ tions at the Highland of Pasto, Narine Department using pots with a capacity of 29J c.c. of dry soil tree of nematodes and infested with s.ooo larva par pot. To know the life cycle it ware made tWCJ trials each one with 100 pots, using a seed potatoe of the ICA Chautala variety of fd class. Far the first experiment it were processed 5 pots each 8 days and 5 pats each 4 days in the t'd experf...ment; it was -used for each reading the Oostenbrink method (separation of filiform larva and adult males), end ths Fenvdck method (separation of cysts from soil). L The counting and measuring of the different nanatode cyst stages, was made with the help of a staroscops and a microscope. It was determi­ ned the life cycle of the cyst nEr.tatode of the potatae Globodera palli ,Es, was developed within a period cf 91 days; passing far its diffe­ rent stages which are: the egg, the larvae (its four larvae instars) and the adult {msle an female). The lasting of the different stages was: 1 1 5 days for the egg; 34 days for larvae (t1d instar); 7 days for larvae (fd instar), 3,J5 th - days f'or larvae ( 4 instar) and 45 days for the adult f anale. To study the cyst latency it were used 100 pots inoculated with new cyst, in a relation of 5.ooo viable larvae per 2ED c.c. of dry soil t::nd 100 pots with old cyst with the sa.rne via.bili ty. It were aill!lysed 3 pots of old cysts a.nd J pots of new cyst each 8 days, and by the cCJunting o'f a::lcsianad l~rva it 0:Ya3 detsrmined that VII • BIBL.IDGRf.FIA 1. BAZAN DE SEGURA, c. The golden nematode in Peru. Plant disease reporter, ~: 253. l .'372. 2 • 83··iAVID:.._S, T • C. y RUEDA~ N .F. Oistribuci6n de las cbs ~pecies del nenutodo quiste de la papa en NErino. Tasis'de Ing. Agro­ noma. Univcrsidad de Narine, Fae. de Ciencias Agricolas, Pas , to. 41 p. 1.975. (Macanografiada). 3. CALZADA, 8. J. i,,\etodos estadisticos para la investigaci6n, Oistri buicbr Jose Calzada B. Lima, Peru. pp. 494. 1.964. 4. C~HTO 5A81JZ, W.. y SCURRAH, M. M. ds. Identificaci6n da especies del nanatocb dal quiste de la papa en poblaciones foJ1dinas se­ gun la secuencia de color de la hembra. 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DE suao A PARUR DE LOS 55 DIAS OESPUES DE LA SIEMBRA ., ; Machos Hen bras Dias I II III IV v x I II III .IV v -x .. 56 5 0 0 0 5 2 590 205 270 180 80 263 60 0 0 0 20 0 .4 145 255 210 m 25 137 64 10 0 20 0 0 5 180 23J 95 275 120 180 .. . :·l ca 5 a 0 5 0 2 105 525 80 2?5 105 218 ?2 0 .a 10 0 115 25 325 400 130 210 55 224 ?6 2J 0 10 0 10 8 80 205 250 155 2'25 183 80 15 0 85 10 115 45 40 45 20 155 125 77 84 25 5 3J 5 45 22 190 ?O 15 35 330 140 85 3) 125 20 55 140 ?4 0 65 485 13J 0 136 ' -: ~· .. 92 13J 10 135 15 55 69 10 10 20 15 15 14 96 25 20 25 10 40 24 . 15 55 25 0 5 20 -2- TABLA II I 8~SAYO EQ..OSIClJ (Oostenbrink) lAAVAS POR 100 GAS. DE suao - MACETEROS Sianbra 30 I/79 Dias I II III IV v x ·- 11 Lectura 1 0 0 0 0 0 0 21 Lectura 8 5 5 0 0 5 3 31 Lectura 10 0 5 a 5 0 2 4~ Lectur# 15 20 5 10 10 5 10 51 Lactura 20 0 a 0 435 20 101. 51 Lectura 24 215 15 445 440 595 442 71 Lectura 29 500 215 505 655 470 469 81 Lectura+ 35 530 280 51.0 320 575 473 9!1 Lectura 41 55 ~o 480 540 835 453 lQi Lectura 48 80 ?5 50 470 285 192 11• Lectura 55 0 5 0 0 0 l 12! t.ectura 50 15 45 BS 5 0 30 131 Lsctura 65 80 10 ?O 0 5 33 14il Lecture 72 25 0 0 0 0 5 l.5i Lectura 82 0 0 0 D 0 0 16! Lecture ~8 0 G 10 0 0 2 17~ Lectura g] 0 10 0 5 0 3 + ~.,i;d.ms ec.losi6n a los 35 dias, 5§ senana despues de la sianbra. -3- TABLA III II 8'JSAYO EQOSIQ\J {Oostaibrink) LARVAS POR 100 GRS. DE suao .. Maceteros - Sienbra 19 VI/?9 Dias I II III IV v x 1:¥A Lectura 4 0 0 0 0 0 0 2• Lectt..Ta a 0 5 5 a 5 3 ~ 31 Lectura 12 0 5 0 5 0 2 4! Lectura 15 5 5 0 0 15 5 5i! Lsctura 20 20 10 0 5 5 8 51 Lectura 24 40 10 25 70 160 61 ?I Lectura 28 15 180 50 305 40 118 81 Lectura 32 220 425 310 . 275 595 355 f 91 Lectura + 35 240 300 330 435 1.020 475 10fl Lectura 40 180 555 455 480 255 337 11.Q Lectura 44 180 130 145 350 325 228 121 Lectura 48 195 200 85 210 230 164 l3A Lectura 52 335 425 270 570 145 359 14ii Lectura 55 530 205 Z7D l80 80 253 ,_: 151 Lectura 60 145 255 210 50 25 137 161 lectura 64 180 230 95 2?5 -120 180 171 Lectura 6B 105 525 80 275 105 218 18• Lectura 72 325 400 130 210 55 224 19! Lectura 76 80 205 250 155 225 183 201! Lectura 80 40 45 2) 155 ·125 71 ~ 21.§ Lectura 84 190 70 15 35 ~o 140 221 Lectura 88. 0 li5 485 l3J 0 135 2~ Lectura 92 10 10 20 15 15 14 241 Lectura 96 15 55 25 0 5 20 ~~ -------~ + ~a'dna eclosian 35 dias c:Espues de la sisnbra, 52 senana ~ i I -4- TAfl.A IV I ENSAYO VIABILIDAD LARVAS VIVAS POR 100 GRS/suao i Maceteros - Dias l" . II III IV v -x 11 Lectura. l 2.025 1.920 2.150 1.600 l.73J 1.885 .. 21 Lectura 6 l.925 1.880 1.400 1.470 2.170 1.759 31 Lectura 10 2.340 2.720 3.:!.40 1.890 1.595 2.335 41 Lectura 15 2.455 1.95) 1.765 1.720 2.355 2.049 Si Lectura 20 1.110 615 1.070 9?0 885 970 I 51 Lec'tura 24 715 965 745 1.070 675 834 ?! Lectura 29 320 3ElJ 290 410 410 355 81 Lectura 36 1.065 720 470 610 595 690 gt Lectura 41 285 :EO 880 370 785 542 lOi Lectura 48 200 240 600 575 405 404 l -. 111 Lectura 55 560 .aos 190 120 50 237 121 Lectura 60 135 405 220 70 175 201 139 Lectura 65 225 120 310 225 35 183 14! Lectura 72 2!:D 390 260 535 685 422 15~ Lectura 82 120 640 185 85 455 299 15~ Lectura 88 120 630 170· 90 43) 238 17~ Lectura 13'} llO 540 1B2 90 456 275 / r -- -5- TAa.A v II ENSAYO ( \/If-\BILIDAD) - LARV!:\S VIV N3 POR 100 GRS/sua.o M a c eteros Dias I II IlI DI v -x - 11 Lectura 4 2.453 l.960 _l.865 l.53J 2.3Sl 2.051 , 21 1..ectura a 2.240 2.5.'20 3.15] l.?90 1.530 2.275 31 Lectura 12 1.920 1.125 1.210 1.025 1.010 1.253 41 lectura 16 1.325 1.135 1.SJ5 1.220 1.320 1.301 SA Lectura 20 1.100 1.230 535 1.375 1.215 1.113 51 Lectura 24 ?3J 690 1.145 l.200 705 894 ?I Lectura 28 2.110 1.995 1.735 1.735 1.540 1.843 ...... f 81 Lectura 32 1.680 890 1.300 1.215 1.250 1.25? 91 Lectura 35 1.160 1.290 l.280 1.230 l.025 1.197 I 10" Lectura 40 1.345 610 l.365 l.195 l.633 1.233 111 t.ectura 44 l.:BO 945 1.105 885 1.120 1.089 121 Lectura 48 880 1.255 845 1.310 1.490 1.193 131 Lectura 52 1.055 1.195 1.095 860- ?80 997 141 Lecture 55 660 S75 785 91{) -- 1.020 790 15i Lectura GO 555 770 610 920 770 7Z7 161 Lectura 64 ?10 935 620 885 3aJ 530 171 Lectura 68 600 SJ5 720 515 705 635 - 181 Lectura ?2 460 390 350 415 420 409 :.__:]~ ~ ... 2 :·~·::;L, ~ ~~~ ~.- i'::: ·~~:-!Ct t:_·.~ s ·i~ :·.~ 455 475 4~ '?-Ji t_ ·:K-: : ~ _,i~:-:·~ 2D z:.:a ,'._~'.YJ 3DG 4fi) 235 34? 21.i Lectura 84 575 805 790 920 695 777 22! Lec:tJ.ra 88 330 310 555 560 310 415 23~ Lectura 92 4?0 ?10 505 635 ?25 629 24! Lact~Ta 96 425 =so 610 365 435 445 -5- TAa.A VI ENSAYO DE LATENGIA EQOSIOO (Oostenbrink) LAAVAS POR 100 GAS. DE suao w'PARACION QUISTEE NUEVOS - QUISTES VIEJOS -·-·-1 Quistes Nuevos Quistes Viejos Sienbra 15 vII/BO Dias I II III x I II III x 1• Lectura 19 0 0 0 0 10 40 u 18 21 Lectura 2S 40 35 5J 41 85 ?O ~- 63 ,, .· -1 3i Lectura 40 275 ?5 35 1213 225 220 405 233 ~ 41 Lectura+ + E4 135 125 125 128 480 370 175 34l. ' 5! Lectura 61 135 75 335 188 210 25J 250 253 I 61 Lectura 68 70 120 195 128 135 55 45 ?8 l ?fl Lecture+ ?5 270 23J 110 203 400 230 275 331 I 81 Lectura 82 40 ao 180 100 3J BO 95 66 I + Maxima er..-1.osiOn quistes nuavos a los ?5 dias despues de la sianbra. t ++ [ Maxima sclosion quistes viejos a los 54 dias de.spues de la sienbra. La eclosiOn en quistf..?5: nue .10s fue reprnsentativa ~ partir de las 51 dias, en quister:: viej'..1s acur:c:!~o norm::llmonte. -?- TPa..A Vll -- BJSAYO DE LATENCIA VIABil...IOAO LARVAS VIVAS POR 100 GRS. DE suao W.~PA8ACIC1'J QJISTES NUEVOS - QUISTES VIEJOS Qui.stes NuS\JOs Qii.stes Viejos ! _I. ..__ , Dias I II Ill I II !I! li! Lectura 19 1..95· 2.09.J 2.42) 2.021 1.975 1.445 1.155 1.525 : - 21 L~tura 28 2.140 2.955 2.575 2.590 2.485 2,.570 2.13J 2.335 31' Lecture 40 1.270 980 2.345 1.531 1.335 1.805 1.045 l..~s 4i Lecture sa. 1.895 915 1.230 1.353 770 1.53) 1.200 1.173 J_ Si! Lectura 6l l.EDO 1.335 1.230 1.338 l.080 620 1.180 950 L 51 t..ectura 5S 690 1.485 1.355 1.175 1.490 995 410 955 ,-- ?A Lectura 75 7.1..5 735 500 683 BOO 1.~o 1.051 1-- 955 I L Bi Lectura 82 1. ">35 855 485 895 1.c-oo 1..260 1..845 1.545 I [_ l [ l - ".~. -- .......... -.... --.. ----- -- ... ~-· ....- -..- ~'"""'-"'"·""· ....._ - w ............. ~~- ~--···-"'· •• ·---...... ~~-- .....