-/ ¿<,;4?'J r-- '"'1 ¡ I 1- - .. ~ J. -, I - 'ATonqs F1 ;1 aPARAS ITaS DEL ARPOZ t,J ~ J ~ (OLECClOi~ HISTCRlCA JallO Castaño Z , * '. . -- los n~todos consb.tuyentm grupo claranente deflm.do dentro de los lrlvertebrados los n~todos son ub1CUOS y nUITerosos En 1931 se habían descrl.to 4601 espec1es fuferentes I:e estas, 2205 espec1es son paras1las de vertebrados, 231 espec1es son paras1tas de 1nverteorados, 1175 especws V1ven en aguas saladas y 990 espeC1es V1ven en aguas dul- ces yen elsuelo !:entro de.este últllTO grupo están 1ncluídos los nema.- todos parásl.tos de plantas Se ha calculado que en una hectárea de suelo cult1vado hay nás de 7000 ID1llones de nematodos, cas1 todos ellos loca11zados en los pr1- ITerOS 6 cm de la capa arable Los nematodos f1top1lras1toS pt.eden ser e:1dopar~s1tos o ectoparás1tos, afu-eos o subterraneos, consb.tuyendo uno de los grupos de fl.toparásl.tos más :unportantes de nuestra agrl.Clüttlra. Rararrcnte cualqt11er culuvo se encuentra libre de nematodos f1toparásl.- tos y su presenC1a generalmente pasa desaperclb1da deb1do a su t.arra.'lo ID1crOS05p1CO y pos1c1ón proteg1da en el suelo. La mayor pc-rrte de los f1tOparásl.tos son, en C1el.-bO sent1do, par~S1tOS db11gados pues de pocos de ellos se sabe que se al:urentan en otra founa. El prllrer mfoure de nemátodos alllrl8ntánc3oc;en de te)1do vegetal fue daca por Neddham en 1744 El halló Áng(una :tJu..t<.u en granos de * Postdoctorado, ,1983 11 q SOd 1 ~ NAYG 159'5 2 tngo que él nusrro cons:tder6 estar atacados p::¡r carbón El dcsconocll1Uen- to del tenu y la prevalente controvers:ta sobre la trona de la generac:t6n espontánea echaron una cortma de hurro sobre el descubnnuento el cual no trascend:t6 n:t tuvo secuelas En 1855 Berkeley encontr6 Mel.o-<.dogynl! sPP , . causaroo n&:Iulos en las ra:tees de pepmo. Por la nuSl1\a ép::¡ca lfueJtodeJta. .6CMch:tu dest.ru1a los cultl.vos de remolacha azucarera en Europa cont:t­ nental. Hasta los años de la guerra europea se =eyó que Me1.o-<.dogyne y llueJtodeJta. eran los fuucos géneros f:ttoparasl.tos. Entre esos años y la II Guerra Munfual se hallaron especJ.es capaces de atacar la parte aérea de las plantas, tal es el caso de Aphe1.encho-<.du bUM.y-<. y V,aytenchlLÓ anglLÓ.tIu, que oarasl.tan al arroz. En la post-guerra se desarro1l6 el con­ trol qufrru.co de ne.rtátodos con funugantes. }\deMás se establec1.6 la ex.l.S­ tencia de muchas otras formas dafunas a las plantas fuera de las hasta entonces conocl.das. La asocl.acl.6n de ne.mátodos ron algunas enfertrEdades patol6;:¡:tcas y fl.sl.ol6;:¡l.cas ha sJ.do reconOC!l.da muy recl.entemente. La mteracc1.6n entre Me.to.{.dogyne. spp. y FlLÓaJUWn mond-<.6olUlle es bl.en conoclda Parece ser que los ne.rtátodos son atra:tdos p::¡r el bJ.6XJ.do de carbono y otro<:l gases los cuales son emanados en mayor cantJ.dad de las ral.ees de plantas enfermas que de las ralees de plantas sanas. Tambl.én puede presentarse interaccl.oncs antagonístlcas = es el caso de Aphel.encho-<.du buó eu-<. y Lepto.6p/¡a.eJua. .6a.tv~ De acuerdo a Nonaka (1959), caro consecuenc:ta del ataque de A BU6e.U«, la actJ.vl.dad de enz:unas respuaton3s se mere- menta est~ando la res1stenCl.a de la planta de arroz a la pudrl.c16ndel tallo causada p::¡r L .6a.tV-<-lt« 3 A¡:urC'.ntcrncnte los ncrrB.tcdos producen nBS que sli'1ple her~das ya que se ha est¿illlcc~do e> . 'pc.urnental.rrG1te que las plantas oon her~das art~- í~c~ales en las ra~oes no muestran lIl=errento en sintO'BS, por lo tanto, es posible que los nemátcdos lIlducen tamb~én alterac~ones b~cqufrrQcas en los teJ~dos afectados l\Unque es fuf~c~l obtener lIlformac~6n exacta acerca de las pér- d~das ocaswnadas por los nemátodos a los cult.J..vos, en los Estados Un~dos se estJ.rra que las pérd~das anuales provocadas por estos rru.=oorgaru.srros en 12 cult~vos asc~enden a más de 500 rru.llones de dolares. En arroz se . ha estmado que las pérfudas asc~ende:n al 6% (Anon , 1971) Datos esta- dfstJ.oos lIld~can que en los Estados Urudos el total de pérfudas ocaswna­ das por nemátodos asc~ende al 10% de la prcducc~6n agrfoola, lo cual eqtuvale a unos 2000 rru.llones de d6lares anuales. En latmoamenca es poca la ~ormac~6n que se fuspone aoerca de los nemátcdos f1toparás~tos que afectan al arroz. El problema aurrenta cada vez más deb~do a la extensa área senbrada en arroz (8 2 rru.llones de has) (CIAT, 1982) a las CCil1llIllcac~ones def1c~entes y a la falta de personal capac~tado para estud~ar los prdblemas y asesorar a los agr~cultores la prevenc16n o reducc~6n de las pérfudas a causa de los nemátodos fltopará- sltos, oonstltuye un Med.l.o de aurrentar los rend1m1entos por área de cul- tJ.vo (Taylor, 1968) No obstante ser el arroz uno de los cult.J..vos báSl- oos para la al~tac~6n de la poblac16n de los palSCS latlonamerlcanos, muy pocos estud~os se han reallzado para deterrrunar aquellos nemátodos f~toparás~tos que afectan o pueden afectar la producc~6n de este cultlVO 4. I.os nenáta10s ütoparásüos varían tanto en tamaño caro en fol:'ln3. la mayoría de ellos nu.den entre 300-100()l{de long~tud - algunos llegan a rredJ..r 4000A:::- fOr 15-3Sj{de fuárretro (llgTl.OS, 1978). D2b~do a su fuárretro reduc~do son mv~sl.bles a s:unple v~sta, p?.ro fácllrrente obser- vables al llUcroSCOplO Sm embargo, las h€!"lbras de algunas espec~es son fac~1nente v~l.bles a s:unple v~sta delndo a que se lunchan al alcanzar el estado adulto adqw.r~endo forma esferolde o de pera (Flgura 1). re los 12 gffieros refOrtados atacando al arroz (Table 1), 2 gffieros están conh­ nados a la parte a€rea de la planta y 10 gffieros al s~tan9. racheal. la claslfieacloo taxonónl.ea de estos gffieros se detalla en la Table 2. NEMA.TQ!X)S QUE Kr~ A IA PARl.'E AEREA DE IA PLl\Nl'A DE ARRROZ _ NE'!l\\itodo de la HOJa o Punta Blanca (Apheleltcho-t.du bUM.y~ Chnsue). En 1915 Kakuta CJ.tado por OU (1972) reg~tró fOr pr.urera vez la presenc~a de este nE'!l\\itodo en el Ja¡;:6n. El nE'!l\\itodo se halla amph~te fustnbu.ldo por JT1LlChos países de Europa, Afrl.C3, Asla y .l\rr'érlea En este 1l1t= continente se ha observado la enfennedad en Estados Un~dos, Méx~co, ama, El Salvador, y Brasll (Feakm, 1971, Rlbel.rO, 1971, Castaño, 1974) Los daños provocados fOr el ataque de la enfennedad son severos Atk::tns & Todd (1959) estl.ll'latOn que los rend~entos se pueden reducl.r hasta un 50% en var~edades susceptl.bles En Talwan, Hung cltado por Ou (1972) en un estufuo hecho con 10 varledildes de arroz halló que las pérd~das en el renduru.ento ascend~eron hasta el 46% = >' SS f i se;:;;;¿g¿¿: ; e > ;::o=- Oollchodorus ~ :3 ...".'.e.: :.::;:::¡.:. ".'S===::;-.~.ª .".." íiC.::i!!""~::.;a'C:::::·:::~::!c:s;:;:2CJ"""""'i!!!ii1!S:::::=====:==::o BelonolOlmus R lyI h I 21 o ene uus Cnconema8.. ::: ;-;:,. 20 • 5 """;;:··:¡¡"",,,§E9~=====::;~~~~~':r:=====:;:::==:=:::::z:e?-::?XlphlliemQ Tyren.• C~hUIU~ 19 6 cc::.:. :::::;:, ::."C==::..."",.,,~§23?;;?:Joi:i!(='Esg::>:S::¿lQ5:S.::iii¡¡;,,;;;,";;?=::::» Hop!o!almus • 7 e I -~ e C3> "'- ? Rolylenchus a 9 •C: ::$: S¡te¡¡'"; ;~:3:. .: :•= ~~!;li:t O• :¡ t;i; ;i ;:;:::X:::C:I¡ ;:ttt:::l:!= :::;¡::::::::,,::... Dllylenchus 18 10 - • ;; , 3 Aphe!encholdes ti - -".. iS. - - -5?dW* ....., Tylenchorhynchus 12 "'·OS-:ZI="~-!:::'3:0~·==:!:::=="'''' Trlchodoru$ • 13 """"az'"::;;-~;;::=::iE=::::=","" Radophol liS Heterodera 17 14 >dB==",-",,'0 :&:=_ Pralylenchus 15 Eíf'" - ",,! :-#? Cnconemoldes 16 -.:="""'. .".'" Poratyl enchu$ I o F~gura 1 Morfol~i:a y tamaño relatl.vo de los nE!11átodos fltoparásltoS 'ruente Aqnos, G N 1978 P1ant pathologv. AcaOÉ'l"lC press 703 p TABLE 1. NEMATODOS FITOPARASITOS DEL ARROZ ( OILIjZa. 4a.U.va. L.) Espec~e (s) Nombre coman D~str~buc~6n , ,I G~nero re ~strada (s) ea r!if~ca Aphelenchol.des A. bu¿q.!f.(. Nerrátodo de la hoja o AIrÉr~ca, Afr~ca, Asia punta blanca Europa Ditylenchus 'D. a.ngUl>:t!u. Nemátodo del tallo As~a H~schmanru.ella H. OIL!fZa.q. Nemátodo de la raíz AIrÉr~ca, Africa, As~a H. ¿p~eca.uda.td H. t.hOItnU \ H. .unamuJr..(. H. CJllida.CILeY!I1. H. muCILona;(;ul, Melo~dogyne M. g~C.O.e.a. NeIl'átodo nodular de la AlrÉrica, AfrJ.ca, Asia M• .wcoglUta. varo raíz a.CIL.t.td Hetero:l.era H. Oll!fZíl.t<.c.Ul> Rotylenchus Rot!fte.nc.hUl> spp. Nenátodo espiral Jlrrénca XJ.plunena X. OILbum Nenátodo migratorio Africa, Asia X. pa.Jr.a.l. e.taJua. e. Hoplolainuls H. 9 a.tMtUl> NeIl'átodo de lanza AsJ.a H. .wckc.r.t.ó ,, TABLE 2. CLASIFICACION TAXONOMICA DE NEMATODOS FITOPARASITOS DEL ARROZ Clase Subclase Orden Suborden Superfamilia Fam:f.lla ~ero Nematoda Secementea Tylenchida TylenchJ.na Tylenchoidea Tylenchl.dae D~tylenchus • Tyl.e.ncOOrhynchus HlISCJ1ll'aXl.!ll.e1la 'I'hrophurus Heteroderl.dae Melo~dogyne Heterodera Hoplola:ímidae Hoplola:urus Pratylenchus Hehcotylenchus FDtylenchus ( • Crl.conerratmae Cr~conem:)ldes Aphelenchina ~oidea Aphe1enchOl.dl.dae Aphelenchol.des Menophorea Dorylaimida Do:r;yla:!nuna Do:r;ylalI!l::ll.dea IongJ.dorJ.dae Xl.p!unerra Dorüall11US i • B Sínta:nas El ncrnátodo es ectop:¡rásl.to Generalmente los sínl::cm3.s se maru.­ hastan al :uuc~arse "lperíodo de elongaC1.6n de las plantas. Estas cuan­ do son atacadas carecen de v~gor y producen panículas pequeñas La lon­ gl.tud de las panículas y el número de esp~gas produc~das es reduc~do, s~endo mis evl.dente hac~a la parte ternuna1 de las panículas en donde con frecuenc~a las glumas están ausentes Las panículas afectadas pre­ sentan alto porcentaJe de esterl.hdad con granos pequeños y dl.storsl.ona­ dos No todos los granos ;;¡.n una panícula son afectados por punta blanca. Las hoJas super~ores, en especl.al la hOJa bandera son marcadarrente defor­ madas y ela em=rgencl.a en las panículas es l.ncanpleta y de maduracl.6n tar­ día según Atkms & Todd (1959) las varl.edades resl.stentes raramente pre­ sentan Sfu~B fohares o en la panícula no obstante haber presencl.a de -._- lleI'látodos en ellas. Orgamsmo causal Después de regl.strarse la presencl.a del n€'.!l'átodo en el Jap6n, se observó en los Estados Uru.dos en el año 1935 los sful::cm3.s de la enfenre­ dad pero la causa fué atribuida a defl.cl.encl.as de hl.erro o magnesl.o (Todd & AtkJ.ns, 1958) No obstante eral ley (1949) ccmprob6 que el agente causal era un nernátodo Yoshl.l. y Yamanoto (1950) l.denufl.caron al orga­ msm::> caro ¡lpl,cl.eneho.{.dv., oJtyzae. Yoskoo, pero luego Allen (19521 cl.tado por OU (1972) J.nd1.c6 que el nernátodo de la punta blanca referl.do caro Aplte,f.e.nc!¡o.{.dM oJttjza.e. era el nuSlTO Apfllil.e.nclw.{.du bu.óe.y.{., Bl.enda éste el ncrnbre usualmente ar.pleado. 9 C~cla de v'lda D:1 la [poca de la ímmac~6n de ) a esp~ga los nanát.ooos nugran d lils glumas y pe:rmrmecen dentro de la palea del glano Según Huu-Ha~-Vuong (196~) la tcmpera~ura 6ptlma para el desarrollo ele los nanátooos es 28°C ra c~clo de vlda es de 3-6 dJas Para su normal desarrollo el l'emC'ítooo :U:- q1uere hurredad relatlva super~or al 70% Ln granos secos el nanátcdo se conv~erte en un orgaDlSlID anab~6hco, y según ALkJ.,ns y ~'lard1ettl (1979), el nanátooo puede ~manecer en ellas por un períooo de 2 años Huang al (1977) en Brasü, observando 32 muestras de arroz de 2-5 meses de cosechad..ls, encontraron un alto grado de l.IlfestaCl6n con A bv,,¡,elj-<- r:l grado de l.Ilfestac16n var16 de acuerdo a la varledad oscllando entre 10-140 nernátoclos por cada 100 senullas Too::! & At:Jur.5 (1958) observdro'1 que el nernátcdo generalmente se locahza en la superhc~e l.Ilt~T',a de la cáscara, algunos sobre 9lanos, y ta'11J::llén alrededor de hOJas J6venes y flores, pero no dentro de los teJldos De acuerdo a 'rareara 1; KegdsaW& cltados por Ou (1972) el nernátooo ,0 ataca el slstema radlcular de las p1ántula'l Rango de ho~pedero~ A éste ncrnátcdo se le conoce un ampllO rango de malezas hOSjx'(}.2-- ras tales cano setarv{.[L V UudA.A , S dCl.Ü-c.a, Pa¡UC.W)) ,¡,al1gu. .w afe, CtjP0W; Uua, e pO!tjJ.>tac./¡{h5 e lmpU..a.ta. cljulld'Uc.a enlre otras (ieaJo.n, 197J, Iluu-Hill-Vuong, 1969, Yoshn .. Ya'namoto, 1950) 10 Control Ia presenclil di¡' más de ;>00 nem§todos en 100 sert1.Lllas de arroz )U5- tJ.fJ.ca LaMr med:l.das de control (Fei:l.1o.n, 1971) Estudlos de reSJ.stcnclil varJ.etal efectuados por AtkJ.ns & Todd (1959) rrostraron que varledades de arroz corro Blue Rose, Caloyo, Celusa, Iaerosse, Arkrose y Zernth, son muy susceptililes a la punta bla.'l.ca, l1Uen­ tras que Bluebonnet SO, Asalu, Fortuna, N=a y Rexoro el.tre otros, fueron reS1S~'l.tes al ataque del nemátodo. Fakano & Yokoyama cltados por Ou (1972) sugJ.eren que en estuchos de reSJ.stencla varletal tanto el número de tallos mfectados corro el grado de presencl.a de punta blanca deben ser CD!1Slderados debJ.do a que algunas varledades aunque son atacadas no muestran smtCffi3.s de punta blanca Varlas mvestlgaclones se han hecho sobre el tra~"itLento de la serm.lla con agua ca1l.ente y prcductos qu5ruoos Cralley (1949) deterl1Un6 que el tratanuento de la senul1a con agua ca1len­ te por 15 I1UDUt.oS a t~aturas de 52-53°C reduJo la mfeccl6n desde un ru.vel de 75% a mellOS del 1%. Así l11l.srro Todd & Atklns (1959) observaron buen control de la enfe:r:rocrlad pre-moJando la sem.üla por 24 horas en agua fría y luego durante 15 I1UDUtoS a tE'mp"'-xatura,> entre 51-53°C La Sl.embra en agua es el rrétodo más sJlT1ple y práctJ.co de a-rradlcacl.6n del nemátcdo (Crallcy, 1956) Es poslble que ésta práctlca no sea necesarl.a realJ.zarla cada año Algunos productos quÍlnl.COS han rrostrado efectl.vl.dad en trata­ lTI1ento de la seT'1l.11a ParaUuon, Systox, Aagrano, bromuro de l~t:J.lo YUlcloJ.­ fon entre otros nluest.ran buen efecto en el cont.rol de la punta blanca (Cralley & French, 1952, Feakm, 1971) Tcmpleton ~ al. (1971) mfonnJ.- ron de la e[a.4:~vldad de conl.rol de la E'nf~d en tratamlC111-o quírnlOO de la Seml.lla con l3enlate 11 F..ste nc.'f'.:ltooo fue descuJ:>l.e:L-to ¡x>r BuLler en 1913 en el I:sLe de Bengala Fl nemálooo aún no se ha reportado en ]\¡rér~ca slendo su presen- Cla común en Asla (Ou, 1972), causando pérdldas en el rendlrru.enlo que han osc:tl¿\do entre 20-90% (HashlOka, 1963, Smgh, 1953) '5 íntOlt>as El ncmátcdo actua caro eClop3Iáslto entre las hOJas Jóve.r¡es que rcaea'1 al punto de desarrollo de la plente, se observa una elorosls marcada segulda ¡x>r marclutarnlento y muerte de las plántulas (pa&nck, 1950) Cuando el nooLcdo ataca plántulas, los srntanas del ataque aparecen aprox:unad;:¡¡¡er¡te 7 mas l11<'ls tarde y, entre 10-15 dlas en plantas próXll"aS o en estAdo de floraelón (Feakln, 1971) las hOJas se pueClen mstorslQ- nar o defonnar severamente Los s:í.ntanas en el campo generalmente se cbservan a los 60 mas después de la slCl'Íbra, por supuesto depc"dlendo de la actlvldad de los nD~tcdos En el estado de embucharnlenLo, los síntorrns en las p::mículus varían cons1derablerrente de acuerdo ul grado y ép:JCa de mfeec'16n Las panícul¿¡s son rctorclda'o o d~storslonadas y los grilllOS de la paníc"U1a son pill elam-mte llenos o vanos tEl:lpranos, la panícula p3rPldJ1E'CC dentro de la ValIlil de la hOJ.:1 l:x-:mdera 12 Butlcr (1913) denonunó al nenátcdo caro TyR-enc.huD i1J1gUÓt:u.6 El nanbre fue camInado a AnguA.Le~na. a.nguóta (Butler) Gcxx'lej, 1932, Y rrG.s tarde a V-áyteflchuD anguót:u.6 (Butler) Fll:tpJev, 1936, el cual, es el nanbre usua]nente empleado. Clclo de Este nenátcdo es conocldo como ectoparáslto Obllgado La lnfec- c16n ocurre en plantulas muy J6venes y, baJO condlCloncs ópbmas de hurre­ dad, los nerrBtcdos suben y se locallzan en los teJldos en =eCJllUento Aunque los nerrBtodos no penetran a través de los te] :tdos, SUCOlonan la saVla de las células eplderrnales A luedJ.da que las plántulas crecen, los nemátodos se van locallzando en los teJldos nuevos Generalmente, los nerrBtcdos se locallzan en la de1 pedúnculo, en el tallo lllJl1e­ dlataIrente arrilia del nudo, y dentro de las glurras Cuando la planta alcanza el estado de rnadurac16n, los nenátodos se ternan lnacUVOS, se enrollan y forman un clrculo con la cabeza locallzada en el centro Cuando se colocan dentro de agua se desenrrollan, se ternan actlvos y v:tgorosamente móvllcs Una humedad rclatlva superlor al 85~ permlte el rrovmuento actl.VO de los nemátodos sm que el agua llbre sea absolu­ taIrente necesarla para tal fm El ncnútcdo es mcapaz de alurcntarse de ffi.'lten al vegetal en des­ ccmposlc16n y por lo tanto es con~ldcxado ceno un pa¡áSltO obllgodo alta­ rrente espoclal:J.zado (Pad\vLck, 1950), efectuándose su rcprcducc16n c.,clu­ Slvanente en plantas de arroz 13 ~rano y ] as panículas producen pocos gra­ nos (Patnal.k, 1969, FeaJan, 1971) Clclo de vlda El segundo estado larval es el que penelra a las ralces a la altura de la zona de elongac16n y se mueve D1tercelarmenle e Dl.tracelularmente, alc.anzando el penblerra ]:;1 SltlO de ataque es el te]ldo vascular de los vasos de rret:axllema (FeakDl., 1971) De acuerdo a Patnal.k (1969), las larvas de M 9 'l11J7uJuc.ofu requleren un l11Íl111ro de 2 dlas para flJar la cabeza dentro del rrerlstel1B aplcal de la raíz La h~pertrofla e mperplasla se Dl.1Cla en las células cortlcales, formando un nódulo al cabo de 3 dlas rus células glgantes se forman al térnlno de 4 dlas después de la p2l1etra­ c~6n, se alargan e ll1terrurry:>en la =ntillUlrod de los vasos Dl.terflrlendo la absorc16n de nutrlentes del suelo Una planta aparenterrcnte sana puede contener alrededor de 2000 nódulos en su s~sterra radlc'ü (Israel et al , 1966a) Una vez que la hembra se establece en la rafz cmpleza a poner hue­ vos, los cuales son deposllac'1os dentro de una nnlrlZ de aparlenc~a gelatl- nosa proyectada a través de la =rle¿a de la raíz haCla el suelo Se est~ que alrededor de 45 nCl1Útodos se pueden hallar por nódulo (On, 1972) 18 M gltflm.{Jl<.COW t:tene un ampho ranga de plantas hosp::xleras Or~gJ.- nallrente encontrado en Cclunuc.htoa c.otol1wn, tambl.én puede atdcar avena, frJ.]ol arbusLJ.vo y varJ.as ~lezas (Ou, 1972) Control El ncmátodo puede ser illact:tvado rnechante illundac1.6n prolongada (lJolhs, 1966) La destruccJ.6n de hospederos alternos y la rotacJ.6n de culLl.vos, reducen sJ.gn:tf:tcat:tvamente la poblac:t6n de nematodos en el suelo (M:l.l1er, 1953) Aunque muchas var:tedades de =oz pueden ser atacadas al hacer l..I1oculaC10nes artJ.[1cJ.ales, solo unas pocas var1edades pernJ.ten el des=ollo completo de M 9~n<.c.OW Var1edades de arroz tales corno TKM 6 Y Patna:t 6 entre otras, son reportadas =1"0 res:tStentes al nematodo # (Israel et al , 1963, Rao et al , 1969) La ap11cac1Ón al suelo de D-D o DBCP reduceP la nodulac16n de las ralces, pern:tt:tendO un desarrollo V1g0roSO de las plántulas e l.ncrementando el peso del follaJe y desarrollo de las ralces (Taylor 8t al , 1966) Nematodo E:nCfU1stador de la RaJ.Z (lietvr.OdVUl oJtyzae. Lue & Berdon) Luc & Berdon (1961) en la Cosla de Im-fü descnbl.CIOn por prmera vez a la especl.c H oJ¡.!Jzae cerro parú observándose áreas de dlsliltograC16n de las paredes celulares dentro del clllildro central No se Observa células glgantes pero Sl la acumulac16n de tllosa en los vasos y la formac16n de teJldo alrededor del cue:qx:> de la herrbra, tendl8ndo a ser alslada del resto de los te]ldos de la oorteza (Berdon & Merny, 1964) Inlclal.rrl3nte los qulstes del ncmálodo tlenon forma de lllT'Ón de color bla¡-¡­ ro y rrás tarde se loman de color 6scuro a negro Varlas generaclor¡es se pueden llevar a cabo en el PUsno culllvo de arroz. Rango de hos~-ueros Se ha repol:1~do que Pal1-<..cwn rc cAtl1od!-l:oa) Cl!¡ll; -gal'L;.. y P Cl!(l1; -!JaLu var 6JtwnCJ1,w e CWll son buenos hospederos del nE.JlÚ lo.' o (lid Lan;:¡)x. C't al t 1963) 20 Contlol De acuerdo a hUlTBzawa (1965) ninguna varledad de arroz es altamen­ te rcsJ.stcnte a H o~yzae Se regulere estudloS más detallados al res­ ¡::ccto Aunque la rotacJ.ón de cultJ.vos reduce la poblac16n de nemálodos en la caFO superlor del suelo, con la sl~bra de arroz ~latrunente después de la rotacl6n se rncrementa de nuevo la poblaclón de nemátodo':> La aplJ.caclón al suelo de nematlcldas tales como D-D o EDB redu~e Sl~­ fJ.catl,rcwente la poblacl6n de larvas y supr:tmen la emergenCla de larvas de los qulsles (Hoshrno et al , 1964) Nemálodo del EnaI1lSlTO del l=z (Ty!enehoJLhyllcJu.Ló maJt.t.uu. FJ.elfung) I:I prl.'TlCr reglst= del nemátodo atacando plantas de arroz fue hecho por FJ.eldrng en 1956 en los Estados U!udos El nemátodo se ha regJ.strado en Afnca, Asla y Arrénca. En l'JÉXlco (Castaño, 1974) Y en Colallina (Gém=z ~ al , 1981) regJ.straron Ty!enc.hoJÚ "nchu!., spp 1\'0 se tlene rnfo:t:JTB.cJ.6n de los posl.bles daños econénucos que este nemátodo pueda causar en cultl­ vos ccrrErclales de a=oz. síntams r:l ncmáLodo es cctOpardSJ.tO y se alllncnta de las células cortlcalcs de las ralces Es =oún encontrar una poblacl6n alta de nerro.todos e.'1 el suelo que rodea al SJ.stcma radlcal De acuerdo a ISLael al (196Gb) aunque el nerro.todo reduce el tamc"Ulo nomal de la planta de ilrl.OZ, no se afecta demaslado su slslcma radlcal 21 -C-on.t_ro-l El tra~~ento del suelo ~'Dn n~'DtlcJdas Lales como el brcrnJro ce Met~lo, 00, Nemagon, mE y DBCP eJerce un buen control de T IIlcv·¡;tuu (Atkms & F~eldmg. 1956. Atkms e~ al , 1957) IR acuerdo a Fol hs (1966), la práctlca de mundar los campos eJcxce un alto grado de cuntro1 de la poblac~6n de nerr'.3todos la ~educc~6n de la poblac~6n de nel1Útoóos d~spués de la mundac~6n comode con el mcrenento de sulüto de l11.drógeno en el campo Se ha deI'Qstrado que los nern5todos son sensililes al sulf~to de h~dr6-- geno a conccntrac~ones super~ores a 10 ppm En ge.'1eral ellsten 4 métodos de control de n~tooos Control blOl6-- gJ.co a través de var~edades res~stenles y otros rnedl.os, control a través de prácl~cas culturales COITO la rotacl6n de cult~vos, control rnedl.ante agentes físJ.COS corno el calor y control quínuco a través de n~atJ.cJ.das Aunque los f=gantes del suelo (Tabla 3) y nemal~c~das de contacto (Tabla 4) eJercen un control satlsfactorlo de n~todos, en muchos casos no está al alcance econrnuco del agrlcultor, de ahí que, la crnU:>lnac~ón fu vanos !retodos de con- trol es lo más recarendable otras espec~es de nenÉtodos han sJ.do reportadas atacando el s~ste1:l3. rad~cal del arroz Los Ilu.cmbros del genéro PlLaXljtCl1chtL6-nem:ítodos leslOna- dores de la raíz-están arnpllam:mte dJ.st.riliuídos y son pr:mc1.jXl.J.Irenle endopa- r~sl.t.os En cases raros se pueden h~l] lar harnUmdo IA-Lrles aé_reas de plantas (Southey, 1959, 'l11ome, 1961) las espeGJ.cs P rJtr~t(?n.;,u., y r bttaC.lt1jllJW,; han s1do reportadus por StcJ.n= (1934) yr,uc (1959) (el.toCo..por Ou, 1972), n'l.::x."'Ct1VJ- rrontc C:lstaño (197,\) en ¡·.<::.AlCO, encontró PltMlj.lcl1dw'!' sw L:mlo en MU25tr:15 de Strlocaro de la raíz pra::o:lcntes d::p] efectos l.nc\''''s.:;;ablcs y pueden 0el. (1cscoplJn1 ecos 21 El género H",C<.co tyitncl'LÚ CO!'1prcnde cerca de 50 espec~es conoclC'las lds Ctldles son eclo:Xlrás~tas de ra~ces y partes subterráneas de plantas Su d~strlbuc~ón es a~l~a y cas~ cualq~er muestra de suelo tomada adya- cente a las ra~ces generaJJrente cont..~ene especímenes de una o rrás espe- c~es de éste género ('iliorne, 1961). Ath~s et al (1955) encontraron la forrra pdrasít~= IIrMcotyieltthuJ.¡ spp en muestras de suelo procedentes de Texas y lDu~s1ana, Estados Un~dos Resultados s:um.lares fueron obtc- mdos por Cas12ño (1974) y Gómez et al (1981) en Héx~co y en Colanb~a, respect~varnente Tlrnffi, en 1956 (c~tado por Ou, 1972) report6 la presen- c~a de la especw H mllLt<'CÁ..Ite.tu.ó en áreas arroceras de Pakl.sLan y, GiSrrez et al (1981) reg~straron la presenc~a de la espec~es H Vty.t1vuna.e. en áreas arroceras de Colorru:lla El género ClUtOne.mo.we1> cuyos rmerrbros se conocen caro nemát..cx1os de an~llo, están !ll'1J?hamente rustrlbuídos alrededor de las ralces de JT\Uchas espec~es de plant..as Holl~s et al (1968) en los Estados Urudos, encontra- ron la especle C 0I10e.;1.6.{.J.¡ causando daños séveros al arroz con pérd~das estlllladas en un 15% En 1931, Imamura (cltado por Ou, 1972) encontr6 e Komabae.¡1.6,u, en el Japón Así rmSl1O, en Pakl.stan, TJ.Jm\ (cüado por Ou, 1972) report6 la presenc~a de la espec~e e /tl.V6;UtlJJ.¡ Castaño (1974) y Gánez et al (1981) reglstraron la presencla de ClUtone.mo~de1> spp en áreas arroceras de Héxlco y CoI~~a, respcct~vamentc Hwmbros del g6ncro Rotyf.e.ncl!lJJ.¡ son pr~Clpalmcnte ectop..TIásltos (SonU1ey, 1959) AUans et al (1955) reg~straron Rotyiencluu, spp = una fo= parasít lca del arro? en lo,," Lslac'os Urudos Resultados s:um.la- res fue~on obt..en~dos por CdsLa.10 (1974) en l1éx~co Ncm:ítcdos ülop5ri1s~Los del 96no1.0 Ti"LoplmULll y Vo "LLJ-Üwll!t.6 fueron rc[..ortildos ¡:or C.LStafb (1974) cn árCilS arrocerclS de l:.2x.1.oo 1,o se twne mforTIUcl.ún de C"pcClC,S de estos generos ¿¡fectando plant,:15 de =oz Dos nem5lcdos l1llgratonos pertCJlCclC'J1tes .:ll orden DorylalliUda, X<.pluneI'1ctpaJtiU;etaJu.e (Luc, 1958) y X Oltbum (S~ddJql., 1964), han 5l.do rc¡:ortados alrededor de rillces de arro<: I:l género X,,-plUJ1erra es esenc~dl- mente l.rnpOrtante en agrl.cultura ya que varlas eSp8Cl.es san oonocldas como vectoras de VlruS TECNlCA DI: ~lUESTRJX), Sr:PAHACICl'N y FIJACION DI: :NI:'iATOOOS A oontmuacl.6n se descnbe en forma detallada e llustrada la foIT.\:! en que se debe realJ.zar el muestreo, "eparac16n y fl.Jac1.6n de nenÉtcdos para la cuantl.íl.cacl.6n e loentl.fl.cac1.6n 0e e~pecl.es íJtopar~Sltas. FIGURA 1 - Sobre tm eJe se tanan tres muestras Ya que el cu1b.vo se encuentra en ple, con una pala se extrae suelo de la rlzosfera, y la planta con sus raíces. Las muestras se 1J1troducen en una tolsa de ¡:;oheuleno la cual se etlquetea en fonna tal que se sepa exactamente el lugar de donde se efect..-u6 el l\Tc1estreo r::n el laboratorlo se anahzará cada una de las partes ¡:;or se­ parado - --------- -~--~-- - ---~-- ~-~- - , t. . _ ..... __ ........ _~ ... __ .. _ .. ' ~ - -- - ... ~ - ~ - -.. ... -- - -.( , rIGliRl\ ? - r:xTRl\CCION DE ~lUI'S'l'Rl\S DE %'EID PARA QUISTLS DC lfu"'ITROPI:Rl\ A dlff'J:enc1.a de los demds géneros, en Heterodera no se rCC11llere ret..J.rar la capa su­ perí~Cldl de suelo seco puesto que 105 quJ.stes 5Obrev:lVen en este Pre­ V.lO al muestJ.eo es recanendable darle una arada al terreno =n el prcp5"J.t o de reduClr Id het:erogene.l­ dad de la fOblac.ló'"l de qulstes, re­ ducíendose en esta forma el eIIOr del muestre:) Empleando el método de muestreo de "Azar dlrJ.gJ.do", se cuadrlcula el terreno a una dlstan­ C.la de aproxJ.madarrente 10 x 10 m En las l.nterseCCJ.ones se teman con la mano muesLras de la superflcJ.e del suelo y se confonra una sóla muestra dent.ro de lma rolsa de fOlJ.et.üeno la cual se etiqueta debldamcnte En el laroratorJ.o la muestra se hcmogcnlza y de ella se teman 1000 ml de suelo para su ==espond.lente anál.lsJ.s ITGURl\ 3 - EXTRACCIo..'l DE ¡"':L~roXJS POR EL E!-lBOOO DI: BAERl-1A:\'N Tomar un embudo de VJ.drlO de paredes lJ.sas (A) Con un ?o--{!azo de " mall ablerta =n abertura superlOJ. a 2 mn de d.l.[IDlCtrc se hace una casuela (B) la cual se .lnserta en el embudo Sobre la malla se = loca una toalla facJ.al o t-aP:ü kleenc.x dobléido (e) Sobre el papel se dCpoSltan 50 ml de suelo procodente de 1<1 muesLra hcm:x)e­ nJ.zadéi El suelo (o) se dlspersa íor­ mar.do una C¡:¡Péi de]g¡¡d¡:¡ Llenar el en­ budo con agua hasLa que haga contucto con lo base l.nfer:LOL de la malla Los ncrná lcx:los péisan a tJ:avés del papel Y se relmen en el tuto de gcm.l (e) Los nemáLodos se pueck.1l Cl11pC7ar a 5ac= después de transC\=J.das 24 horéis, abuendo la llave e'e PJ.nz¡:¡ {O y ce­ Jando que s<11gan uno" 5 m1. de agua -- r ~ - -- ¡-- ~I~--~-I-- --- 1---'- -T~----~ í I I I I 1 ! 1 1 1 1 I f 1 J ,I ,- 1 , e 1 I I - 1- 1 I ~ T --4- -1- "1 -' -t --1 I 1 1 1 I I 1 I 1 I , I 1 -1 _1- _J ___ ..; 1- - - - __ 1 ___L L -r- 1 ~- : I __ L ____ +_ ---- -1----1-1- --:::- 1-----1- , 1 I L __ _ -'- _L I _1 .. e " E ~F ,,- - --- \ \ , \ \ ------- \ - L ____ ... _______ _ ----~- , , \ \ \ \ , \ \ '- -' EX'rRACCIO:-" DG NF.!-WlDOOS MIDIZ\Nt'L lA ffilBINl\.CIOt'l DEL ML1DOO Die. TN417.l\JX) y Ll'lBL'DO DE ~íl\l,N r!GURA 4 - Agl.tar la muestra do suolo en un curo con agua (1) T-DS nema.todos ouedan sUspf'.nfudos en el agua FIGURA 5 - Trasvasar el agua a trav~s de un r-WU.z de 1000/ t(' de abertura (A) a un segundo cubo (2) Los ne­ mátodos pasan a través del tarruz Las part:íc:'I.1- las TIunerales queda..'1 e..'1 el pnruo-r curo Los matar] ales gruesos son reteru..dos por el tarruz FIGURA 6 - Füt rru. el agua del segundo cubo por el tanuz de 53~ de abertura (B) Huchas partículas de horra pasarán a t.rav~s del tam1.Z En este ta­ nuz qucéJ¿m reteru..dos los nernátodos Junto con particulas f=s FIGUHA 7 - Al res~duo que queda en el segundo cubo se le agrega agua, se ag~ta y se pasa nuevamente a través del tarruz de 53)1 de abertura Este pro­ ceso de lavado se rep~te 3-4 veces FIGUnA 8 - Lavar el tarruz de 53 A de abertura =n una ca­ =~ente de agua a baJa pres~ón =n el obJeto de ehnunar las part:ículas más fmas FIGURA 9 - Reco;Jer en un vaso, por lavado los nernátodos reteJudos en el tarruz de 53}{ de abertura FIGUHA 10 - DepoS:ltar la suspens~6n de ncmátodos en un s:u:acuse (A) para exanunarlos en un lIUcros­ COp:lO de d~secc~ón o estereoscóplco Su ob­ servac:l6n puede obst-élcul:lzarse por la abundan­ Le cantldad de partículas f:lnas aue acanpaiían a los nemátodos FIGURA 11 - Los ncmátoclos se pueden separ= de las pc1rtí­ culas de l:lcrra empleando el eMbudo de f.lacrrnanJ1 Los ncmátoclos acLLvos pas.:rrán a través del pa­ pel Y se depos:lt?rán en el lubo de gcm:l (l\) Los nemátodos se pueden saccU: abrlcndo la llave de pl.l1za (B) 1 -- --- - -- '"""- ._-- "" -- A -\---'..-- -- ---------k-- ------ B ----_ ... - (]- • , J',1,' l, Q 1,¡1 ,11 ,1 1, tI'!!, ,', ....... ~;r,r, ,r-- / 1,1 ;1,.',1 ,1, ,, , ,Ij ,l! ' ..... -.. _--- -- - - - B- -- --- --- 0 G) A B ';:,-, -------- - -\------ _o"~ , ,, , ,, \ - \. -''-_:::_--------- ------ -------~\ G r::XTR.'\CCIO'l DI: NEf.JATODJS DEL SJEU)-PJI..IZ-'l'l\IJ..OS-HOJAS Y/ O GRl\J.'lOS t-ICOJA'ITL LA 'l'ECNlCA DI:: V\ CCNTRIruGA FIGDRA 12 - De la muestra de suelo hc::mogem.zada t=ar 1000 ro y verterlos en un cubo con agua (1) y agltar Los nemátodos quedan suspen­ chdos en el agua FIGJRl\. 13 - Trasvasar el agua a t:lavés de Ull tarru.z de IODO? de ab91:turd (A) a un segundo cuto (2) Los ncmátodos pasan a través del ta­ nuz Las partículas nunerales quedan en el pr:L'Ter cuto Los mat.er~ales gruesos son re­ te.'1ldos ¡:or el tanuz FIGl,'RA 14 - Fütrar el agua del segundo cuto ¡:or un tamJ.z de 53 /1 de abertura (B) 1-:1uchas partículas de tierra pasarán a través del tamJ.z. En este tanuz quedan los ne¡nátcdos, Junto con partí­ cu1as hnas. FIGURA 15 - Al reslduo que queda en el segundo cuto (2) se le agrega agua, se aglta y se pasa nuevamente a través del tanuz de 53 /!.j de aJ.::y->-rtura (B) Este proceso de lavado se replte 3-4 veces FIGURA 16 - Lavar el tanuz de S3/1 de abertura (B) con una corr~e.'1te de agua a baJa pres~611 con el obJeto de el=ar las partículas mdS filias FIGURA 17 - Por lavado, recoger en un v~ los nemátcdos reterudos en el tanuz de 53/{de abertura (B)y aJustar el volúmen a 200 rol. FIGURA lB - Lavar !l1'J'" b~en con agua y pesar en una balanza una cant:ldad deterrrunada de raíces, tallos, hOJas o granos, según el caso P:LCar la muestra con unas uJeras FIGURA 19 - tchar la muestra en una llcuadora la cual cont:lene un volúmen dado de agua ConetJ:;dr la l~cuadora por unos 30 segundos i \ -------8- --- ------ B ----- --- ---- - ... ---- _. .. <, -------"'" iI"'< ___ "'" • I • I , I L __ J L-_-:J .-::--=-:1 i. - ~J FIGURA 20 - Transferll la muestra a un vaso (A) a tra­ vés de un tanuz de 1000~de abertura Lavar el tamJ.z con una co:tTlente (le aqua a baja preslón para hacer baJar los nema­ todos retenl.dos en él FIGURA 21 - La suspenslón reccxp.da en el vaso (A) se pasa a través de un tamJ.z de 53~de aber­ tura Lavar blen el tanuz FIGURA 22 - Recoger en un vaso, por lavado, los nema­ todos retenl.dos en el tanu7 de 536 de abertura y aJustar el volurren a 200 ml FIGURA 23 - n volumen de 200 ml ccrnpuesto por ne.'ll.a­ todos más materlal mmeral pr=edentes de muestra de suelo (1), y los 200 ml de sus­ pens:t6n de nemat000s más teJldo vegetal (2), se balancean en tubos separadamente y se les ai!:tcwna kaohn (más o menos 1 cc ¡tubo) y se ag:ttan FIGURA 24 - Centrlfugar a 3000 rpn durante 3-4 nunutos FIGURA 25 - Fl sobrenadante se tlla y se vuelve a llenar los tubos con Rqua sucrosada de 19 2 grados Baume Se balancea a 19ual peso, se aq:tta y se centrlfuga nuevamente a 3000 rpm dlu:ante 3-4 rnmutos FIGURA 26 - El sobrenadante se deposlta en un tanuz de 53./(de abertura, el cual se sumerJo en Wi cubo conteruendo agua FIGURA 27 - Recoger en un vaso, por lavado, los nematodos retenldos en el tarnlz de 53~de abertura FIGURA 28 - Deposltar la suspens:tón de nematodos recog:t­ dos en un Sllacuse y observilrlos en un rruGrOS­ copla estereoscoplO -------,,--;;-¿-;t.-T - ~ '~ :e.::.r :',' ;¡~: ',1 11;.' • I t ¡v 'j .------ - - r -- O O O ~ O ~- .. ,-- ... -- .. O -'" --' O / ,1 , ... -- .,. .. FIGLn~ 29 - Verter en un frasco peque~o Id SuspcnsLón de nerráto::los del Slracuse FIGURA 30 - f.le(hante decantacL6n (2-3 horas), se concen­ tran los nerráto::los por el~acLón de agua volteando cuLdadosamente el frasco o bLen, con la ayuda de una )erlllga, ev~tando crear corrLentcs que puedan agüar a los nemátodos FIGURA 31.- Por cuillquLera de los métodos de extraCCl.6n de nemátodos empleado, obtC'.nellos una suspen­ sL6n de nemátodos Vl.VOS Se calLenta cua1- quLera de los flJadores de ncrnáto::los en baño a maria, y cuando eSté callente (60-65° C) se agrega al frasco un volúmen l.qual al de la suspensl.6n de nemátodos En esta forma los nemátodos quedarán matados y fLJados TECNICA DE EX'I'RAO::Im, DE QUISTES DE HETrRODERA DE MUESTRAS DE SIJEW J)'lEDIAl'lTE EL APARATO DE F e n \~ l. e k. FIGURA 32 - En un recLpLente romeo (A) que uene en Id boca un collar lllchnado (B) y un embudo cen patas (Cl, al cual se le coloca una coladora (D), se echa 250 gr de suelo de la muestra hcrroge.JUzada (E) El recLpl.ente romeo debe llenarse prevlamente de agua En la coladora queda rcte.JUdo todo aquel materlal grueso, el matarLal =eral se precLpl.ta, los quLstes flotan, se deshzan por la superfLeLc del ZJllar mclmado y se recogen en un tamLz de 25~', de abertura (F) ELIMINACION DE IA MATCRIA ORGAl'lICA FIGURA 33 - Con unas uJeras se corta una tJ.ra de papel absorbente de unos 6-7 cm de ancho p:>r unos 20 cm de largo FIGURA 34 - Acaocx:'lar la tLra de J?:.pel en las paredes de un vaso -e----- ~--~- e - A - ,- ,,- ,- ,,' F e o -,...-- -. ---_ ... ' rIGURA 35 - AdJ.Cwnar aqua al vaso hasta la nutad de su volúmcn FIGURA 36 - Ed1ar en el vaso el ¡".atena ! de fl0!fC'~6n que se recog~6 en el tilrt\H de 250/ tÍ FIGURA 37 - Con la ayuda de un gotero echar a! vaso U!1aS 3-4 golas de mezcla ele agua =n Ja­ ron Esta I1'czcla hace que el matenal flo­ tante se cldhwra al papel absorbente FIGV'RA 38 - Darle al papel un tlrón En esta forma todo aquel mat=~al flotante saldrá adhe­ ndo a él FIGURA 39 - e.:tender el papel absorbente sobre un pe­ dazo de v~dr~o FIGlJRA 40 - Observar a! nucros=p~o y con un pwcel extraer 100 qulstes puros los cuales se conservan en un pequeño frasco CONTEO m; llULVOS m::: liErERODERA FIGURA 41 - Del frascoconterllendo qulstes separar 10 al azar y romperlos uno a uno sobre un portaobJetos conten~cndo una gota de agua FIGtJRA 42 - Depos~tar los hucvecülos extraídos de los 10 qtllstes en una probeta, y aforar a 10 rol. con agua FIGURA 43 - Agüar b~en la suspens~6n para que se produzca la fuspeu,a 6n de los hucve­ c11los EAtraer un rol y deposltarlo sobre un contador de Petcrs Este con­ tador está construido en tal forma que la superflcle deflm_da de las cuadriculas ll\Uluphcada. por la altura deflmda de las calzils, da un volÚ lrcn ~gua1 a 1 rol Contar el nCImero de huevec~llos que es­ tán dentro de la cuadrícula Repeur el proceso 3-4 voces y calcular el nú­ \1'CrO prcrrecllo (le hucv(l<:lllos por gr de muestra de sucIo - - ~~~----~~---_._-~- ---.----~. -------r'35\--- -- - ------_;:_ u _- - --- ---- --:::::--- ,~.,.--- ........ , , - t,;\ ----~- ------- -.....-.::. ITCNlCA DI:: M)'\'TAJE DL HCTJ:RODEHA rlGURl'\ 44 - DCpoS~tdL los cJU~stcs de Hetercdcra en un reC'~p.lenlc con agua durante 2-3 horas J:r.:lrél que se n~drat0n y no floten Al cabo de es­ te ~cmpo sacarlos y eYtendcrlos sobre un peddZO de plá~t~co FIGURA 45 - Sobre un portaobJetos colocar un pequeño pedazo de plástJ.co DeposJ.lar el el centro de éste una gola de lact:ofcnol y sobre esta colocar un ~sle rICURA 46 - Con una navaJa "nueva" efectuar un corte transversal J.n:n:2!<:hatamente debaJO de la línea ecuator~al FlGUFA 47 - Con la ayuda de una plilZa y un P2scador, extraer todos los hueveclllos que están dentro del qu~ste Este de':erá quedar to­ talmente vacfo FlGUFA 4B - Con el pr0p5s~to de decolorar el corte, transferJ.rlo a un portaobJetos cóncavo fll cont€.ru..enCo agua oXlgenada de 60 volúme­ = nes DeJarlo allí por varlOS segundos -!!!i = FlGUFA 49 - Con el Un de elmunar el exceso de agua, = pasar el corte 11 un segundo portaobJetos = contenJ.endo alcohol absolutc DeJarlo en este por varlOS segundos ¡¡¡¡ ¡!!!! FlGUFA 50 - Con el obJeto de deslI1fectar el corte, de­ pO!:ntar el corte en un tercer portaobJetcs que contenga esenCla de clavo DéJese en este por unos segundos FlGUFA 51 - Sobre un cubreobJetos, al cual se le depo­ slla una gota de bálsaITO de canaaG, oclocar ClUdadosamente el corte en forma tal que la parte eonvexa haga contacto con el bálsaITO de canadá Sobre un I11J.SITO cubreobJcLos colo­ car unos 2-3 cortes PO:1cr un portE10b)ctcs hac~endo contacto sobre el cubreobJelos FlGUM 52 - Cuilndo se trate de rrontar qu~stes cürlfor­ mes, se colocan sobre el cubrrobJetos cortes acostados y pCl:pcniliculares para faCÜltar la observac~ón del cono vulvar. .. --- ..... [ .. --_e . . -",'" ~---~-------- -- -~ - --- - 'rECNIC'A DE ~'I)Nrl\JE DI:: -ME-LO-IIX_XN.N-C rIGUR". 53 - Sobre un ¡:ortaob]otos ¡:oner un J?2ClUeÍ1o pe­ da.w de pldstlco Dc¡:OSlt..'1r en 01 centro de esto una gota oe lactcfenol y luego colocar so­ bre este una hembra de Meloldoqyne FIGURA 54 - Con una navaJa "nueva", hacer un cortE' transversal lll!l'I'2rL, objetos lU catQ ce U110S 30 lrLLn ..l tos a¡J.ro ~líf::laarrentc C\.lQ'1CO el E-:hCCSO Ce c.']'Ja se rr¡ e'r,txJ.cado de. los Lurd~s del ~rcooJetos sellar este con ro...."J1 .. Z Dz c3da nh.1e.::>tta ¡"'lacar t.~cs re­ pl~('¿.c 1 :;res SdJre 1(,,\5 placas h¿ccr sepeya­ c\6"'1 (1= í.l.LoparCí~lt..o':) y "¡ó fl.toi'~.:u.5slt.O'::';, scp:n:~ r ... 6n de grufOs de gént?..ro~ y '3~!;)arncJ.(1n de teclorps de v~~us rIG1.1'"'A 64 - ID,;, nCl'l"5.tceos flJados se tr,!l's[le.ren <;0'1 Id ayuJ" {e un <..úT'uclo a un 1 "C~plCl' te. 1:x:que."10 ~k 2-3 mI (le Cdp"c~']¿¡d =ntcn~4 hOí')""' a' c"lto Ó:;, las C\.1:l1cs el VOlle" ,~n de alco~o L bc"\"j:lLd FIGJnl\ (l::; - L1U1.!:" 0] l.e~ll-'lCnl( con "'oL.lcJGn SelJ horL D (i\leo lJJ f 95" f gl~ccr:tl;:¡, :'Sl y ¡,;:Olerlo u tu q c,>lufa gt~cl ndJ :l 35' e FIQJR1\ Gri l\l ÍJ~'':ü (~,,'::u( ll'iQ l,-Hcllla fJ,i:) ce ')1JC0- l.un. 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